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文檔簡(jiǎn)介
1、花生是我國(guó)重要的油料作物、經(jīng)濟(jì)作物和出口創(chuàng)匯農(nóng)產(chǎn)品。近年來(lái),我國(guó)花生新品種數(shù)量急劇增加,同時(shí)高頻率的使用少數(shù)骨干親本使品種的遺傳基礎(chǔ)趨于狹窄,從而加大了利用外觀表型性狀區(qū)別不同花生品種的難度?;ㄉ贩N分子ID數(shù)據(jù)庫(kù)的構(gòu)建在花生品種真實(shí)性及純度鑒定、區(qū)試及審定品種質(zhì)量監(jiān)控、品種權(quán)登記保護(hù)等方面具有重要應(yīng)用價(jià)值,花生品種遺傳多樣性研究對(duì)花生品種改良、新品種培育、優(yōu)異種質(zhì)資源的挖掘、創(chuàng)新和利用具有重要意義。
本研究首先對(duì)花生葉片DN
2、A的快速提取方法進(jìn)行了優(yōu)化,旨在篩選出一種簡(jiǎn)便快捷、不影響PCR分析的花生葉片DNA快速提取的方法。利用SSR與AhTE兩種分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)219份花生種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性分析,并且首次采用資源特征分析軟件(ID analysis 1.0)構(gòu)建花生品種的分子ID,用于花生品種的鑒定。主要研究結(jié)果如下:
(1)通過(guò)對(duì)高通量DNA提取法、SDS簡(jiǎn)易法、TPS法以及TENP法四種不同的DNA提取方法進(jìn)行比較和優(yōu)化。研究結(jié)果表明,改良TP
3、S法優(yōu)于其它三種改良后的方法,提取的DNA可用于花生的SSR分析。
(2)利用45對(duì)SSR引物以及31對(duì)AhTE引物對(duì)219份花生材料進(jìn)行擴(kuò)增,所有引物均表現(xiàn)較好的多態(tài)性,且AhTE引物表現(xiàn)出了較高的多態(tài)性。45對(duì)SSR引物共擴(kuò)增檢測(cè)出131個(gè)等位基因,平均每個(gè)引物為3個(gè)等位基因,PIC值最高為0.783。31對(duì)AhTE引物共檢測(cè)出的75個(gè)位點(diǎn),平均約為2.4個(gè),PIC值最高為1.268。
(3)利用NTSYS軟件進(jìn)
4、行聚類(lèi)分析。結(jié)果表明,各花生品種間的遺傳相似系數(shù)在0.59-0.96之間;在相似系數(shù)為0.634處,可以分為6個(gè)類(lèi)群。其中部分花生材料間具有相對(duì)較高的相似系數(shù),說(shuō)明其親緣關(guān)系較近。由聚類(lèi)圖可以看出219個(gè)花生品種的地域特征并不明顯。
(4)應(yīng)用資源遺傳統(tǒng)計(jì)軟件分析獲得品種的特異性指數(shù)平均值為123.288,介于83.437~402.578之間。利用資源特征分析3.0軟件構(gòu)建花生種質(zhì)的分子ID數(shù)據(jù)庫(kù)。利用34對(duì)SSR引物可構(gòu)建1
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