抗雞大腸桿菌病單味中藥篩選及其成分的研究.pdf

1、雞大腸桿菌病是由禽致病性大腸埃希氏菌(Avian pathogenic Escherichia coli，APEC)引起的一種細(xì)菌性傳染病，較常引起敗血癥、心包心肌炎、全眼球炎、關(guān)節(jié)炎、腹膜炎、輸卵管炎和大腸桿菌肉芽腫等。不僅給養(yǎng)雞業(yè)帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，還給人類健康帶來潛在威脅。該病的防治受到細(xì)菌耐藥性、混合感染、繼發(fā)感染等多方面的困擾。近年來，中藥治療雞大腸桿菌病成為研究熱點(diǎn)，并取得一定成果，本文采用體內(nèi)、外抑菌活性試驗(yàn)篩選具有抑菌活性

2、的中藥，并對(duì)抗雞大腸桿菌有效中藥五味子提取物進(jìn)行了成分分析。
　　本試驗(yàn)從2010-2013年山東17地區(qū)疑似發(fā)病雞場(chǎng)進(jìn)行病料收集、細(xì)菌分離鑒定共獲得雞源大腸桿菌83株，并對(duì)分離菌株進(jìn)行血清型和耐藥性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)山東主要流行血清型為O24、O15、O18，分別占24.10％、14.46％和10.84％。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示分離菌對(duì)9種常用抗生素氨芐西林、慶大霉素、卡那霉素、鏈霉素、阿米卡星、頭孢唑啉、頭孢他啶、氧氟沙星、環(huán)丙沙星都有一定

3、的耐藥性，耐藥率在32.53％-80.72％。
　　本研究選擇清熱類、祛風(fēng)類、潤(rùn)肺止咳類、涼血止血類和收澀藥五類共42味中草藥，乙醇、50％乙醇、蒸餾水依次超聲提取，合并三次提取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得中藥提取干物質(zhì)，以環(huán)丙沙星標(biāo)準(zhǔn)品作為對(duì)照藥物進(jìn)行體內(nèi)、體外抑菌活性篩選。體外抑菌活性試驗(yàn)采用管碟法測(cè)定中藥提取物的抑菌圈直徑，結(jié)果顯示夏枯草、黃芩、黃連、金銀花、連翹、板藍(lán)根、桔梗、百部、黃精、五味子、烏梅、石榴皮有體外抑菌活性，抑菌圈

4、直徑在6.05mm-27.70mm。體內(nèi)抑菌試驗(yàn)采用本試驗(yàn)室分離的的編號(hào)為11-29雞源大腸桿菌分離株作為攻毒菌株。結(jié)果顯示五味子對(duì)人工感染雞大腸桿菌病理模型有一定療效，五味子治療組的死亡率顯著低于陽性對(duì)照組(p＜0.05)，有效率和體增重顯著高于陽性對(duì)照組(p＜0.05)，試驗(yàn)證明中藥五味子對(duì)人工感染雞大腸桿菌具有顯著的治療效果。五味子治療組與廣譜抗菌藥環(huán)丙沙星治療組相比，死亡率、有效率和體增重?zé)o顯著差異(p＞0.05)，表明中藥五味

5、子在防治雞大腸桿菌病中與廣譜抗菌藥環(huán)丙沙星作用相當(dāng)。
　　以大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌4種標(biāo)準(zhǔn)菌株和環(huán)丙沙星耐藥及敏感的大腸桿菌分離株為供試菌，以環(huán)丙沙星為對(duì)照藥物，采用牛津杯法和試管雙倍稀釋法測(cè)定五味子提取物對(duì)供試菌株的抗菌活性。結(jié)果顯示五味子提取物對(duì)所有供試菌都有明顯的抑制作用。五味子提取物對(duì)環(huán)丙沙星耐藥菌的抑制作用顯著優(yōu)于環(huán)丙沙星。
　　試驗(yàn)采用HPLC法對(duì)五味子提取物進(jìn)行成分分析，結(jié)果顯示五味子