抗仔豬腹瀉中藥復(fù)方的作用機(jī)理研究.pdf

1、中藥豐富的物質(zhì)基礎(chǔ)決定其良好的抗仔豬腹瀉作用功效，解決了抗生素帶來(lái)的耐藥性和殘留問(wèn)題。通過(guò)適當(dāng)?shù)呐湮樗玫闹兴帍?fù)方能顯著提高藥效，近些年來(lái)抗仔豬腹瀉作用的中藥復(fù)方大量涌現(xiàn)，但在機(jī)理研究方面存在研究方法單一或研究不全面等問(wèn)題。本研究在閱讀大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上選擇了5個(gè)抗仔豬腹瀉作用的中藥復(fù)方，分別對(duì)其進(jìn)行了水提和醇提，創(chuàng)新性的通過(guò)體外的方法研究了中藥復(fù)方提取物的抗氧化作用，并采用藥敏實(shí)驗(yàn)探討了其對(duì)病原微生物的抑制作用，突破性的嘗試新的體外模擬

2、方法對(duì)仔豬胃腸道環(huán)境進(jìn)行模擬，探究中藥提取物對(duì)仔豬胃腸道菌群的影響，最后應(yīng)用蓖麻油誘導(dǎo)小鼠腹瀉，對(duì)抗仔豬腹瀉中藥的作用效果進(jìn)行了比較，研究結(jié)果顯示:
　　(1)通過(guò)體外抗氧化方法測(cè)定5個(gè)中藥復(fù)方及組成復(fù)方的單一中藥對(duì)DPPH·和·OH的清除作用，復(fù)方2、復(fù)方4和復(fù)方5的水提物清除DPPH·作用效果相對(duì)較好，復(fù)方1和復(fù)方3的水提物清除·OH作用效果較好，復(fù)方5水提物清除·OH作用較弱，中藥水提物多糖含量與對(duì)DPPH·和·OH的清除作

3、用分別呈中低度正相關(guān)和不相關(guān)性;復(fù)方2及復(fù)方5的醇提物清除DPPH·作用效果好，復(fù)方3醇提物清除DPPH·作用較差，醇提物黃酮及總多酚含量與對(duì)DPPH·的清除作用均呈高度相關(guān)性，醇提物中復(fù)方1和復(fù)方3清除·OH作用效果好，清除作用較差的為復(fù)方4;醇提物黃酮及總多酚含量與對(duì)·OH的清除作用均呈極低的相關(guān)性。一定濃度下，中藥復(fù)方還表現(xiàn)出協(xié)同抗氧化作用。
　　(2)運(yùn)用管蝶法探討實(shí)驗(yàn)中藥提取物對(duì)仔豬腹瀉致病菌株——大腸桿菌和沙門氏菌的體

4、外抑菌效果，中藥提取物對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌的抑菌效果表現(xiàn)出較大的差異。復(fù)方2水提物和醇提物對(duì)大腸桿菌分別呈低度敏感和中度敏感性，復(fù)方3和復(fù)方5水提物和醇提物對(duì)大腸桿菌則都分別呈中度敏感和低度敏感性，復(fù)方4提取物對(duì)大腸桿菌均為低度敏感，復(fù)方1提取物對(duì)大腸桿菌不敏感，總體上說(shuō)復(fù)方2、復(fù)方3和復(fù)方5提取物對(duì)大腸桿菌抑制作用相對(duì)較好，其次為復(fù)方4，復(fù)方1沒有抑制大腸桿菌作用。復(fù)方1和復(fù)方3的提取物對(duì)沙門氏菌均為低敏感性，復(fù)方2的提取物對(duì)沙門氏菌

5、均為中度敏感性，復(fù)方4和復(fù)方5的水提物對(duì)沙門氏菌不敏感，但它們的醇提物對(duì)沙門氏菌分別呈中和低敏感性，復(fù)方2水提物對(duì)沙門氏菌的抑菌圈直徑大于抗生素處理組，抑制沙門氏菌作用最好。
　　(3)在普通胃腸道模擬的基礎(chǔ)上考慮日糧及殘留營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)因素建立體外仔豬胃腸道發(fā)酵模型，分別探討5個(gè)中藥復(fù)方及在藥敏實(shí)驗(yàn)中抑菌效果較好的單位中藥提取物（白頭翁、黃連及防風(fēng)醇提物，黃芪、防風(fēng)和黃連水提物）在模擬的仔豬胃腸道環(huán)境中對(duì)有害菌（大腸桿菌和沙門氏菌）及

6、有益菌（乳酸菌）的影響，結(jié)果表明在胃模擬中，復(fù)方1和復(fù)方4水提物不能有效抑制大腸桿菌，但對(duì)沙門氏菌生長(zhǎng)均有一定程度的抑制作用，其余中藥及中藥復(fù)方提取物對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌生長(zhǎng)表現(xiàn)出抑制作用;復(fù)方1和復(fù)方3水提物、復(fù)方4醇提物能顯著促進(jìn)胃液中乳酸菌的增長(zhǎng)，其余中藥復(fù)方促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)作用不顯著?？漳c模擬中，中藥復(fù)方對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌均有顯著抑制作用，復(fù)方2、復(fù)方4的醇提物及復(fù)方1、復(fù)方5的水提物能顯著促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)，其余復(fù)方提取物促進(jìn)乳酸

7、菌生長(zhǎng)作用不顯著。抗生素對(duì)仔豬腸道有益菌群和有害菌群均表現(xiàn)出抑制作用，不能維持仔豬胃腸道菌群的平衡。
　　(4)通過(guò)人工建立蓖麻油誘導(dǎo)小鼠腹瀉模型，綜合分析了小鼠灌服蓖麻油后6h的首次腹瀉時(shí)間、每小時(shí)腹瀉情況、腹瀉頻率及腹瀉抑制率等指標(biāo)發(fā)現(xiàn)劑量濃度為500mg/kg的復(fù)方1、復(fù)方4、復(fù)方5醇提物及4000mg/kg的復(fù)方2水提物在6h內(nèi)均有很好的抗腹瀉效果，復(fù)方1和復(fù)方3水提物無(wú)抗腹瀉作用，其余中藥復(fù)方均有一定程度上的抗腹瀉作用，