轉(zhuǎn)fat-1基因牛外源基因整合位點(diǎn)鑒定.pdf

1、臨床醫(yī)學(xué)研究表明，n-3多不飽和脂肪酸（n-3 polyunsaturated fatty acids，n-3 PUFAs）對(duì)人類健康十分重要，而高水平的n-6多不飽和脂肪酸（n-6 PUFAs）對(duì)人體是有害的，常與癌癥、心腦血管疾病以及部分精神疾患的發(fā)生有關(guān)。因此，在日常飲食中，攝入的n-3和n-6 PUFAs的比例維持在1∶1是十分重要的。針對(duì)目前n-3 PUFAs來源有限的狀況，利用轉(zhuǎn)基因家畜提供n-3 PUFAs可能是一種有效的

2、方法。在本研究中，將fat-1的蛋白質(zhì)編碼區(qū)序列按照哺乳動(dòng)物密碼子的偏好進(jìn)行優(yōu)化，構(gòu)建表達(dá)載體，利用體細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)fat-1轉(zhuǎn)基因牛。本試驗(yàn)使用接頭介導(dǎo)PCR法對(duì)轉(zhuǎn)基因牛ZK002的fat-1側(cè)翼序列進(jìn)行分析，利用Real time PCR技術(shù)檢測(cè)了外源基因的拷貝數(shù)并檢測(cè)整合位點(diǎn)周邊基因的表達(dá)情況。此外，還分析并比較了該牛8種組織中的fat-1的表達(dá)情況，以及在肌肉、脂肪和肝臟3種組織中與脂肪合成代謝相關(guān)基因的表達(dá)情況。結(jié)果表明: