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1、梨腐爛病是梨的重要枝干病害,可導(dǎo)致樹勢(shì)衰弱、果實(shí)產(chǎn)量下降,嚴(yán)重發(fā)生時(shí)甚至造成毀園,而且因缺乏有效的防治方法,目前病情仍在不斷擴(kuò)大,對(duì)梨產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重威脅。本研究主要進(jìn)行了我國梨腐爛病菌致病力的分化分析及差異菌株的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,并對(duì)不同種質(zhì)資源的抗病性進(jìn)行了鑒定,可為有效控制病害的蔓延加重、保障我國梨的安全生產(chǎn)提供參考依據(jù),取得的結(jié)果如下:
1.對(duì)豐水梨的離體枝條、葉片、嫩梢和果實(shí)分別采用不同方法造成傷口后接種梨腐爛病菌比較致病表現(xiàn)
2、,并用致病力已知的菌株在豐水和康德梨上對(duì)其測(cè)定效果進(jìn)行驗(yàn)證。研究結(jié)果顯示:枝條經(jīng)環(huán)割、打孔、10針刺傷及燙傷后打孔方式接種的發(fā)病率均為100%,而經(jīng)芽痕、燙傷和3針刺傷方式接種的發(fā)病率分別為15%、40%和55%,且前四種接種方式病斑顯著大于后三種接種方式;葉片經(jīng)1針刺傷、3針刺傷和6針刺傷處理產(chǎn)生的病斑間存在顯著性差異;嫩梢和果實(shí)采用不同方式接種的病斑間無顯著性差異。但在豐水梨和康德梨上對(duì)篩選到的不同組織的接種方式驗(yàn)證發(fā)現(xiàn),各菌株只有
3、在枝條經(jīng)打孔接種后產(chǎn)生的病斑的顯著性差異與已知致病力菌株的強(qiáng)弱相吻合。結(jié)果表明采用枝條打孔接種的方法測(cè)定效果快速、穩(wěn)定,可作為梨腐爛病菌室內(nèi)致病力的快速測(cè)定方法。
2.利用枝條打孔方法將來源于我國14個(gè)省市、5個(gè)梨系統(tǒng)的91份梨腐爛病純化菌株分別在阿巴特(西洋梨)、豐水(砂梨)、玉露香(白梨)、南果梨(秋子梨)和庫爾勒香梨(新疆梨)5個(gè)品種上接種,分析梨腐爛病菌株的致病力分化與其地域、系統(tǒng)來源間的相關(guān)性。結(jié)果表明:不同來源的梨
4、腐爛病菌株接種不同梨品種的病斑大小均存在顯著性差異,且同一菌株接種不同梨品種的病斑大小程度也有異。根據(jù)其綜合致病強(qiáng)弱可將所有菌株劃分為3個(gè)致病類型,其中強(qiáng)致病類型菌株16份,占17.6%;中致病類型菌株70份,占76.9%;弱致病力菌株5份,占5.5%。且不同地域和系統(tǒng)來源的梨腐爛病菌株間致病類型的分布比例也存在明顯的差異。
3.采用第二代測(cè)序技術(shù),將上述梨腐爛病菌致病力測(cè)定中篩選到的致病力存在明顯差異的菌株F-HN-6和F-
5、HN-2a-1的總RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。結(jié)果顯示,強(qiáng)致病力菌株F-HN-6相對(duì)弱致病力菌株F-HN-2a-1存在6323個(gè)差異表達(dá)基因,其中上調(diào)表達(dá)基因2816個(gè),下調(diào)表達(dá)基因3507個(gè)。對(duì)差異表達(dá)基因的GO功能分類結(jié)果表明與氧化還原過程、催化過程及碳水化合物代謝過程相關(guān)的基因所占數(shù)目較多。KEGGPathway顯著性富集分析表明,與代謝過程、次生代謝物合成過程、淀粉和蔗糖的代謝過程相關(guān)的基因顯著富集。
4.采用離體枝條分生孢
6、子懸浮液和菌絲塊接種測(cè)定211份梨種質(zhì)資源對(duì)腐爛病的抗性,結(jié)果顯示:不同種質(zhì)資源對(duì)梨腐爛病菌的侵入和擴(kuò)展的抵抗均存在差異,抗侵入的占17.5%,抗擴(kuò)展的占35.1%;同一種質(zhì)資源對(duì)病菌侵入與擴(kuò)展的抵抗之間也有異,對(duì)病菌侵入和擴(kuò)展抵抗一致的占30.3%,不一致的占69.7%;所有供試材料對(duì)病菌侵入和擴(kuò)展均為高抗(HR/HR)的占1.4%,抗?。≧/R)的占4.7%,中等(M/M)的占12.3%,感病(S/S)的占10.9%,高感(HS/H
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