具有毒死蜱降解特性的植物內(nèi)生菌的分離篩選.pdf

1、毒死蜱作為替代高毒有機(jī)磷農(nóng)藥的主要品種，在我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用量大且范圍廣，對(duì)農(nóng)產(chǎn)品安全帶來極大的隱患。植物內(nèi)生菌是指一生或至少一生中的某個(gè)階段能進(jìn)入活體植物組織內(nèi)，且不引起植物明顯病理變化的微生物。與從土壤中分離微生物相比，植物內(nèi)生菌能有效地在植物體內(nèi)定殖，且不易受外界環(huán)境的影響?；诖?，利用具有農(nóng)藥降解特性的植物內(nèi)生菌加速農(nóng)作物體內(nèi)殘留農(nóng)藥的代謝與降解，有望成為控制農(nóng)藥大量使用帶來殘留污染風(fēng)險(xiǎn)的新途徑。
　　本研究分別以從農(nóng)藥廠

2、廢液池旁采集的菊科植物小飛蓬，以及韭菜和水稻為供試植物，采用表面消毒研磨法，以毒死蜱為單一碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基連續(xù)多代培養(yǎng)篩選毒死蜱降解內(nèi)生菌，并對(duì)其在植物體外與體內(nèi)的毒死蜱降解特性進(jìn)行分析，采用生理生化測(cè)定結(jié)合16SrDNA序列分析對(duì)分離的內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行菌種鑒定。為進(jìn)一步探索利用內(nèi)生菌調(diào)節(jié)植物體內(nèi)殘留毒死蜱等環(huán)境污染物的降解機(jī)理研究建立基礎(chǔ)，研究結(jié)果可為利用植物內(nèi)生菌調(diào)控農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留提供理論指導(dǎo)，為農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留污染控制與治理提供新的思

3、路。主要研究結(jié)果如下：
　　1、從植物小飛蓬體內(nèi)分離出一株阪崎克羅諾桿菌屬（Cronobacter sp.）植物內(nèi)生細(xì)菌 XFP-gy，其對(duì)初始濃度為20 mg/L的毒死蜱的9天降解率為77.28％。外加碳氮源可以促進(jìn)XFP-gy的生長(zhǎng)，并將其對(duì)毒死蜱5天降解率由69.59%提高到98.0%。菌株 XFP-gy降解毒死蜱的最佳培養(yǎng)條件為30℃和pH為7.0。此培養(yǎng)條件下，增加培養(yǎng)液中原始接菌量，降低底物毒死蜱的初始質(zhì)量濃度，可明顯

4、提高XFP-gy對(duì)毒死蜱的降解效率。
　　2、從韭菜體內(nèi)分離篩選出一株鞘氨醇單胞菌屬（Sphingomonas sp.）植物內(nèi)生菌HJY，它在15天內(nèi)可以代謝95.88%初始濃度為20 mg/L的毒死蜱；1%的外加葡萄糖可以將其對(duì)毒死蜱的降解率提高到6天98.48%；其最適毒死蜱降解條件為：毒死蜱初始濃度10 mg/L，接菌量2%，pH6，培養(yǎng)溫度30-35℃。
　　3、從粳稻內(nèi)分離出5株具有毒死蜱降解特性的植物內(nèi)生菌：銅綠

5、假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa)DG，巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium） DGB，鞘氨醇桿菌（Sphingobacterium Canadense）DJ，彎曲假單胞菌（Pseudomonas）DJA和短小桿菌屬（Curtobacterium plantarum）DJB。這些水稻內(nèi)生菌除了在體外對(duì)毒死蜱具有一定的降解能力外，還可以轉(zhuǎn)接入粳稻內(nèi)，通過產(chǎn)生吲哚乙酸(IAA)、溶解磷、產(chǎn)生氨基環(huán)丙烷羧