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1、華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文α1，3半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶反義載體轉(zhuǎn)染豬腎細胞的研究姓名：陳建國申請學位級別：碩士專業(yè)：臨床獸醫(yī)學指導教師：郭定宗鄭新民2002.5.1華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文StudiesonporcinekidneycelllinestransfectedbyantisenseP—QGTPostgraduate：ChenjianguoTutor：GuoDingzongZhengXinmin(C01legeofAnimalHusb
2、andry＆VeterinaryMediCineHuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070)AbstractsToexploretheoptimumconditionsforpordnekidneycelllines(PKl5)transfectedbyantisenseP—aGTTheantisenseP—aGTwastransferedintoEcoliDH5ausingCaCl2andex
3、tractedPKI5weretransfectedbytherecombinantlyliposome—P—nGTafterpurlfiedbyPEG8000andminieolumnsThepositiveeellswereseIectedbyG418andidentifiedbyPeRandSouthernhybridizationTransferedthenucleusfrompositivePKl5celllinesintoe
4、nucleatedoocytesResults：TheplasmidspuriliedPEG8000andminicolumnsweresuitable。ThemethodofliposomeiSSimpleoperation，hightranfecfionofficiencyandlowcytotoxicityThereagentscanbestablizetotransfectthePKl5becauseofitsnoharmful
5、tothecellsThepositiveclonecellswereobtainedafter810daysusing35099／mlG418anddemonstratedbyPeRandSouthernhvbridizationTheoocyteswhichtransferredintonucleuswereactivatedanddeveloped2cellstageembryosKeyword：Q1，3galactosyltra
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