氨基酸在牛體外受精胚發(fā)育過程中的作用及其代謝量的研究.pdf

1、內(nèi)蒙古大學(xué)博士學(xué)位論文氨基酸在牛體外受精胚發(fā)育過程中的作用及其代謝量的研究姓名：李榮鳳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師：旭日干20030401李榮鳳內(nèi)蒙古大學(xué)博士學(xué)位論文還能通過保護(hù)胚胎的內(nèi)部結(jié)構(gòu)、維持胚胎正常的三維結(jié)構(gòu)以及調(diào)節(jié)胚胎代謝，從而改善牛IVF胚的質(zhì)量。1“。在不含任何氨基酸來源的成份明確的培養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)，氨基酸的添加尤為重要“。目前一般都使用Sigma、Gibco或ICN生產(chǎn)的商品氨基酸溶液，這三種溶液配方一致，都是針對(duì)小

2、鼠L細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的，雖然都包含20種必需和非必需氨基酸，但濃度與哺乳動(dòng)物雌性生殖道內(nèi)的差別較大，且不含有雌性生殖道里所含有的鳥氨酸、瓜氨酸和?；撬?，不能為胚胎發(fā)育提供最優(yōu)化的氨基酸環(huán)境。哺乳類雌性生殖道內(nèi)游離氨基酸的分析主要集中在小鼠“、兔1、和綿羊“”上。牛的研究相對(duì)較少，早期的研究見于六十和七十年代““”1，由于分析手段和條件的限制，所得結(jié)果與Elhassan(1999)等“71近年來的結(jié)果相差幾倍至十幾倍。Elhassan雖然采用

3、了精確的分析手段，但只分析了胚胎發(fā)育的輸卵管階段和子宮階段相應(yīng)部位的液體，而同一部位液體在不同發(fā)育階段的變化卻沒有分析。Hill等“”用添加羊輸卵管液濃度的氨基酸進(jìn)行牛IVF胚的發(fā)育培養(yǎng)，獲得了較商品氨基酸理想的結(jié)果。目前尚未見到將牛輸卵管濃度的氨基酸用于牛IVF胚發(fā)育培養(yǎng)的報(bào)道。關(guān)于胚胎外源混合氨基酸代謝的研究，除了vKLamb(1994)“”和RTPartridge(1996)”1分別檢測(cè)了小鼠和牛囊胚在體外培養(yǎng)數(shù)小時(shí)后對(duì)外源氨基酸

4、的吸收量外。尚未見到其他相關(guān)研究的報(bào)道。本研究主要探討了氨基酸對(duì)牛IVF胚抗凍性的作用(第一章)，分析了不同發(fā)情時(shí)期母牛生殖道液體的游離氨基酸種類及含量(第二章)，并在化學(xué)成份明確的培養(yǎng)系統(tǒng)的基礎(chǔ)上，探討生理濃度的氨基酸對(duì)胚胎發(fā)育和抗凍性的影響(第三章)，另外，在排除胚胎氨基酸代謝研究影響因素的基礎(chǔ)上，檢測(cè)了牛IVF胚胎在不同發(fā)育階段及全程發(fā)育過程中對(duì)生理濃度氨基酸的代謝情況(第四章，第五章)。本研究對(duì)于了解早期胚胎的發(fā)育機(jī)理具有重要的

5、理論意義，同時(shí)，對(duì)于胚胎體外培養(yǎng)條件的進(jìn)一步優(yōu)化具有實(shí)際的指導(dǎo)意義。參考文獻(xiàn)：IChangMCFertilizationofrabbitovainvitroNature1959，184：4664672ChangMCExperimentalstudiesofmammalianfertilizationZoolSei1984，1：3493643BrackeRRGBousquetD，BioceML，eta1Normaldevelopmentf

6、ollowinginvitrofertilizationintheCOWBi01Reprod1982，27：1471584BouShorganFertilizationofgoatandovineovainvitrobyejaculatedspermatozoaaftertreatmentwithionophoreA23187BullNipponVetAndZooltechCoil1984，33：2192215，HanadaA，Invi