灰飛虱體內(nèi)水稻條紋葉枯病毒的快速檢測(cè)及Wolbachia KefKL功能研究.pdf

1、水稻條紋葉枯病毒(rice stripe virus, RSV)是單鏈負(fù)義編碼的RNA病毒,它能引發(fā)水稻條紋葉枯病,導(dǎo)致水稻產(chǎn)量嚴(yán)重下降.這種病毒主要經(jīng)灰飛虱傳播,可以在灰飛虱體內(nèi)復(fù)制并經(jīng)卵傳給下一代.所以,灰飛虱體內(nèi)水稻條紋葉枯病毒的快速而準(zhǔn)確的檢測(cè)對(duì)水稻條紋葉枯病的預(yù)測(cè)和防治都具有重要的意義.在這里,我們采用RT-PCR的方法對(duì)單個(gè)傳毒灰飛虱體內(nèi)的水稻條紋葉枯病毒進(jìn)行了檢測(cè).用位于水稻條紋葉枯病毒的依賴于RNA的RNA聚合酶基因上的

2、一對(duì)引物,我們從帶毒灰飛虱和染病水稻葉上都特異性地得到了445bp的PCR產(chǎn)物.同時(shí),在灰飛虱actin基因內(nèi)含子和外顯子相連處設(shè)計(jì)了一對(duì)引物,其PCR產(chǎn)物做為RNA特異的陽性對(duì)照,從而保證RT-PCR結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確性.我們還優(yōu)化了雙重RT-PCR的條件,即一次PCR反應(yīng)得以同時(shí)檢測(cè)水稻條紋葉枯病毒和灰飛虱actin基因的存在.我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明RT-PCR方法可以快速而準(zhǔn)確地檢測(cè)出灰飛虱帶毒與否,從而得以對(duì)水稻條紋葉枯病的爆發(fā)進(jìn)行早期監(jiān)測(cè)