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1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文EGCG與銅離子的相互作用及其細(xì)胞生物學(xué)行為姓名:于海寧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):茶學(xué)指導(dǎo)教師:沈生榮20040201摘要據(jù)調(diào)查,在歐美,人類因患前列腺癌引起的死亡率現(xiàn)已位居第二,僅次于肺癌。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究初步證實(shí)E G C G 具有一定的預(yù)防、治療前列腺癌的作用。銅離子是人體必需的微量元素,過量積累或缺乏會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生,包括癌癥。金屬離子與兒茶素的相互作用是近年來茶葉生物化學(xué)和生物無機(jī)化學(xué)的
2、研究熱點(diǎn),而銅離子與E G C G 的相互作用及其細(xì)胞生物學(xué)行為至今國(guó)內(nèi)外少有報(bào)道。本文利用前列腺癌細(xì)胞( 包括激素依賴型前列腺癌細(xì)胞L N C a P 和非激素依賴型前列腺癌細(xì)胞P C 一3 ) 培養(yǎng)體系研究了E G C G 、C u ”對(duì)前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響和損傷機(jī)理;E G C G 與C u 2 + 共存對(duì)前列腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,及兩者生物學(xué)活性的變化;細(xì)胞培養(yǎng)條件下E G C G 含量變化速度;E G C G 、C u 2 +
3、 存在及兩者共存時(shí),F(xiàn) - 1 2 培養(yǎng)液發(fā)光強(qiáng)度的動(dòng)態(tài)變化和自由基的產(chǎn)生情況。M T T 法實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),E G C G 與C u 2 + 均能抑制L N C a P 細(xì)胞和P C .3 細(xì)胞的生長(zhǎng),并與劑量呈正相關(guān),E G C G 與C u 2 + 抑制作用的最佳作用時(shí)間均為2 4 小時(shí);加入C u “,只有E G C G 與c u ”的相對(duì)濃度較高時(shí),E G c G 對(duì)c u 2 + 誘導(dǎo)的L N C a P 細(xì)胞毒性有一定的抑制
4、作用,否則促進(jìn)細(xì)胞死亡;在P c 一3 細(xì)胞培養(yǎng)體系中,c u ”存在下,E G C G 對(duì)C u ”誘導(dǎo)的P C - 3 細(xì)胞的毒性明顯減弱;L N C a P 細(xì)胞培養(yǎng)體系中,當(dāng)后加入C u ”時(shí),C u 2 + 對(duì)E G C G 誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性有極顯著促進(jìn)作用,在同樣水平下,C u 2 + 對(duì)E G C G 誘導(dǎo)的P C - 3 細(xì)胞毒性無顯著影響。增加P C .3 細(xì)胞體系中E G C G的濃度,C u 2 + 對(duì)E G C G
5、 誘導(dǎo)的P C .3 細(xì)胞毒性有促進(jìn)作用。而在E G C G 存在下,C u 2 + 對(duì)L N C a P 細(xì)胞的毒性顯著降低。P C 3 細(xì)胞體系中,低濃度E G C G 對(duì)c u 2 +誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性明顯減弱,但高濃度E G C G 對(duì)低濃度C u 2 + 誘導(dǎo)的P C .3 細(xì)胞的毒性無影響,只有高濃度C u 2 + 誘導(dǎo)的P C .3 細(xì)胞的毒性才能被抑制。當(dāng)后加入E G C G時(shí),只有E G C G 與C u z + 濃度比達(dá)
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