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1、阿維菌素(avermectin)是一組含有8個(gè)組分(Bla、B2a、B1b、B2b、A1a、A2a、A1b和A2b)的大環(huán)內(nèi)酯類衍生物.其中avermectin Bla的生物活性最強(qiáng).該研究通過基因置換技術(shù)定位中斷了avermectin無效組分的合成途徑以獲得有效組分,其中的關(guān)鍵酶基因?yàn)镃5 O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因和α-支鏈酮酸脫氫酶基因.C5 O-甲基轉(zhuǎn)移酶基因(aveD)位于阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)
2、染色體的3.4kb BamHI片段上,該研究先構(gòu)建Avermectin基因組約3.4kb BamHI片段的亞基因文庫,用PCR擴(kuò)增獲得該基因的連鎖基因C5-酮基還原酶基因(aveF),并將其作為探針篩出aveD的克隆子pAD1101.測序后與GenBank做同源比較,確證為該基因.這一新組分經(jīng)過精制結(jié)晶后溶于氘代丙酮,通過質(zhì)譜分析,1H-NMR、13C-NMR和二維NMR,證實(shí)該化合物為oligomycinA.根據(jù)oligomycinA
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