高粱抗高粱蚜遺傳分析及SSR標(biāo)記研究.pdf

1、高粱蚜是高粱上的一種重要的害蟲(chóng),每年對(duì)全球的高粱產(chǎn)量和品質(zhì)造成嚴(yán)重?fù)p失.抗蚜品種是防止高粱蚜的最經(jīng)濟(jì)、安全、有效的方法.近年來(lái),分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展為加快作物育種進(jìn)程提供了強(qiáng)有力的武器.但應(yīng)用于高粱上的分子標(biāo)記研究起步較晚,從而影響了高粱蚜抗性育種的進(jìn)程.該研究利用河農(nóng)16×千三的雜交組合,對(duì)高梁蚜抗性鑒定方法,抗性遺傳和SSR分子標(biāo)記等進(jìn)行了深入的研究.其目的在于:探索高粱蚜抗性遺傳鑒定方法,充分了解高粱蚜抗性遺傳的特點(diǎn),建立一套適合高

2、梁蚜抗性的SSR體系,找到與高粱蚜抗性基因連鎖的分子標(biāo)記,為最終掌握高粱蚜抗性遺傳規(guī)律,克隆高粱蚜抗性基因奠定基礎(chǔ).主要研究結(jié)果如下:1.河農(nóng)16×千三雜交組合的親本、F<,1>、F<,2>田間鑒定及遺傳分析,結(jié)果表明:河農(nóng)16具有對(duì)高粱蚜免疫的抗性,千三為高感高粱蚜品種,所得F<,1>為高抗,F<,2>抗、感分離比例符合3:1,因此河農(nóng)16的抗性是由一對(duì)基因控制的,抗蟲(chóng)性為顯性,F<,1>表現(xiàn)完全顯性.2.選取河農(nóng)16作為材料,采用單

3、因素篩選和完全隨機(jī)組合相結(jié)合的方法,建立了一套適合高粱抗高粱蚜的SSR體系.其中TaqDNA聚合酶0.3μL(5u/μL),10×PCR Buffer 2.0μL,引物1.5μL(10 μ mol/L),模板DNA 60 ng.利用該體系進(jìn)行擴(kuò)增,所得譜帶清晰、穩(wěn)定、非特異性帶少.3.用99對(duì)SSR引物對(duì)雜交組合河農(nóng)16×千三的親本、抗感基因池進(jìn)行擴(kuò)增,結(jié)果表明:在兩親本之間,有17對(duì)引物表現(xiàn)明顯而穩(wěn)定的多態(tài)性,散布于8個(gè)連鎖群上,多態(tài)

4、性頻率為17.8％;但在抗感基因池間只有一對(duì)差異引物.這說(shuō)明河農(nóng)16和千三間遺傳背景的差異是比較大的,因此分離群體多樣性越大,越適宜構(gòu)建作圖群體.4.分別用親本間有多態(tài)性的17對(duì)SSR引物對(duì)河農(nóng)16×千三的F2隱性單株進(jìn)行擴(kuò)增,并對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析,表明:與高粱蚜感蟲(chóng)基因相關(guān)的只有1個(gè)SSR位點(diǎn):Xtxp6.采用MAPMAKER軟件,對(duì)Xtxp6的所有F2單株的SSR擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析,初步確定了高粱蚜抗性標(biāo)記基因與SSR標(biāo)記位點(diǎn)Xtxp