農(nóng)桿菌介導(dǎo)的幾丁質(zhì)酶基因、β-1，3葡聚糖酶基因轉(zhuǎn)化辣椒的研究.pdf

1、本研究的目的是利用基因工程手段，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將抗真菌病幾丁質(zhì)酶基因、β，1-3葡聚糖酶基因?qū)肜苯?，獲得抗真菌病的轉(zhuǎn)基因植株，提高辣椒的產(chǎn)量和品質(zhì)，為辣椒的抗病分子育種提供基礎(chǔ)材料和理論依據(jù)，為解決辣椒抗真菌病問題探索新途徑。主要研究結(jié)果如下：1建立了辣椒高效再生體系(1)確定了誘導(dǎo)芽分化的培養(yǎng)基為：MS+6-BA5mg/L+IAA0.2mg/L，30g/L蔗糖，0.8％瓊脂，pH5.8。(2)確定了誘導(dǎo)芽伸長的培養(yǎng)基為：MS+6-

2、BA3mg/L+GA32mg/L，30g/L蔗糖，0.8％瓊脂，pH5.8。(3)確定了生根培養(yǎng)基為：MS+NAA0.1mg/L，30g/L蔗糖，0.8％瓊脂，pH5.8。(4)不同的外植體分化率不同同一基因型的子葉、子葉節(jié)和下胚軸三種外植體，子葉節(jié)和子葉的分化率最高，下胚軸次之。1號品種子葉節(jié)、子葉和下胚軸的分化率依次是100％、100％和56.7％；2號品種子葉節(jié)、子葉和下胚軸的分化率依次是100％、100％和55％；3號品種子葉節(jié)

3、、子葉和下胚軸的分化率依次是90.9％、88.3％和53.3％。(5)基因型不同，分化率不同。供試品種1號、2號和3號的子葉分化率分別為100％、100％、88.3％，下胚軸分化率分別是56.7、55％和53.3％。2建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的辣椒遺傳轉(zhuǎn)化體系(1)確定了Km在不同階段的篩選濃度芽分化階段，Km的篩選壓力確定為：1號、2號的子葉為50mg/L，3號子葉為40mg/L;不定芽生根階段Km的篩選壓力確定為15mg/L。(2)確定了除