版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、Cyanothece51142染色體復(fù)制起始區(qū)的預(yù)測(cè)及驗(yàn)證染色體復(fù)制起始區(qū)的預(yù)測(cè)及驗(yàn)證IdentificationofaputativechromosomalreplicationiginfromCyanothece51142學(xué)科專(zhuān)業(yè):生物化工研究生:胡耀中指導(dǎo)教師:黃鶴副教授天津大學(xué)化工學(xué)院二零一三年六月I摘要Cyanothece51142是一種具有固氮作用的海洋藍(lán)細(xì)菌,在白天存在日光時(shí)進(jìn)行光合作用,而在晚上進(jìn)行固氮作用。2008年,
2、Welsh等報(bào)道了它的全基因組序列,但是進(jìn)行基因注釋時(shí),用傳統(tǒng)的GCskew以及DnaAbox分析方法不能確定它的復(fù)制起始區(qū),而未能標(biāo)注出復(fù)制起始區(qū)的基因序列。FengGao教授利用在線iC預(yù)測(cè)軟件iFinder對(duì)其環(huán)形和線性染色體的復(fù)制起始區(qū)進(jìn)行了預(yù)測(cè),本課題對(duì)FengGao教授用iFinder預(yù)測(cè)的Cyanothece51142的染色體復(fù)制起始區(qū)的結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證,并得到了預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。首先,利用DNA重組技術(shù)得到包含環(huán)狀及線狀染色
3、體iC的克隆載體pEASYT1iC及pEASYT1iL,表達(dá)DnaA蛋白的表達(dá)載體pGEX4T1DnaA,表達(dá)DnaA(IV)蛋白的表達(dá)載體pET28aDnaA(IV),轉(zhuǎn)化進(jìn)入大腸桿菌DH5α、BL21及BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞中構(gòu)建了基因工程菌DH5α(pEASYT1iCpEASYT1iL),BL21(pGEX4T1DnaA)及BL21(DE3)(pET28aDnaA(IV))。其次,對(duì)BL21(pGEX4T1DnaA)及BL2
4、1(DE3)(pET28aDnaA(IV))的誘導(dǎo)條件經(jīng)過(guò)一系列優(yōu)化后確定了誘導(dǎo)表達(dá)條件,經(jīng)過(guò)GSTtag及Histag親和層析純化得到了DnaA(IV)蛋白并用于后續(xù)結(jié)合實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證。最后,進(jìn)行DnaA(IV)蛋白與Cyanothece51142環(huán)狀及線狀染色體的iC區(qū)的EMSA結(jié)合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,驗(yàn)證顯示實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期結(jié)果相符,證明DnaA(IV)蛋白能夠與預(yù)測(cè)的iC區(qū)呈現(xiàn)濃度依賴型結(jié)合,為iC區(qū)的軟件預(yù)測(cè)結(jié)果提供了實(shí)驗(yàn)佐證,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示軟
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 49761.釀酒酵母染色體復(fù)制起始相關(guān)新蛋白的篩選
- DnaA蛋白不是大腸桿菌染色體復(fù)制起始的唯一調(diào)控因子.pdf
- 大腸桿菌QseB-QseC信號(hào)途徑影響染色體復(fù)制起始和細(xì)胞運(yùn)動(dòng).pdf
- 染色體
- 基因和染色體的關(guān)系基因在染色體上
- 染色體變異
- 男性生殖異常與染色體異常及染色體多態(tài)關(guān)系的探討.pdf
- 染色體畸變
- 染色體變異
- 染色體病
- 染色體組
- 菠菜Y染色體重復(fù)序列的分離及染色體定位.pdf
- 龍須草染色體數(shù)目變異及rDNA在染色體上的定位.pdf
- 基因在常染色體上還是性染色體上的判斷
- 茶樹(shù)染色體核型分析及TCS基因在染色體上初步定位.pdf
- 染色體病專(zhuān)升本
- 5.2 染色體變異
- 染色體變異要點(diǎn)
- 染色體結(jié)構(gòu)變異
- 洋蔥伯克霍爾德氏菌ATCC17616復(fù)制起始區(qū)的序列分析及驗(yàn)證.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論