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1、VEGF是生物體內(nèi)具有重要生物學(xué)作用的生長因子。該生長因子直接或間接地調(diào)控著牛卵母細(xì)胞成熟與早期胚胎發(fā)育。本研究利用體外受精、免疫熒光、激光共聚焦掃描以及RT-PCR等技術(shù),探討了牛早期胚胎發(fā)育過程中VEGF與其受體Flt-1蛋白及mRNA的表達(dá)。在此基礎(chǔ)上,通過添加不同濃度VEGF,觀察該生長因子對牛體外受精胚胎早期發(fā)育的影響。研究結(jié)果如下: 1.在牛卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體、未成熟卵母細(xì)胞、2-細(xì)胞期胚胎、8-細(xì)胞期胚胎、桑椹胚
2、及植入前囊胚中均能檢測到Flt-1蛋白與mRNA。Flt-1蛋白集中分布于各發(fā)育階段胚胎卵裂球細(xì)胞膜及近膜下區(qū)域,在卵母細(xì)胞胞質(zhì)中也能看到其特異表達(dá)。表明Flt-1的表達(dá)具有時序連貫性。 2.VEGF蛋白與mRNA僅表達(dá)于牛卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體、卵母細(xì)胞與體外受精囊胚中。免疫熒光染色結(jié)果顯示,VEGF蛋白主要定位于未成熟卵母細(xì)胞與囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞的細(xì)胞膜及膜下區(qū)域。在2-細(xì)胞期、8-細(xì)胞期以及桑椹胚期胚胎中,未檢測到VEGF蛋白與
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