東北主栽楊樹品種的ISSR分析.pdf

1、楊樹具有速生、輪伐期短、繁殖容易、材質(zhì)好、雜交容易等優(yōu)良特性,因而人們對它的栽培十分感興趣,大量天然雜種和人工培育的新品種相繼產(chǎn)生,致使楊屬在分類上存在著相當(dāng)大的混亂.因此在生產(chǎn)上和科學(xué)研究中常常出現(xiàn)同物異名、同名異物,品種混雜等現(xiàn)象,這對林業(yè)生產(chǎn)影響很大,尤其在良種的推廣上造成了一定困難.傳統(tǒng)的標(biāo)記已明顯跟不上對越來越多的自然選育和人工培育的品種進(jìn)行鑒別的要求.為了解決楊樹品種混亂的問題,該文利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù),對東北主栽楊樹的

2、70個無性系的親緣關(guān)系進(jìn)行研究,結(jié)果如下:(1)經(jīng)過反復(fù)對比試驗(yàn)建立了適合于楊樹的ISSR-PCR分析的反映體系和擴(kuò)增程序,即在20ul反應(yīng)體系中加入模板20ng、引物0.5/m、dNTP0.20mmol/l、Taq 酶1.5U、Mg<'2+>1.5mM,充分混勻后,94℃加熱3min,使模板DNA變性,然后進(jìn)入下列溫度循環(huán):94℃變性30s、56℃退火50s、72℃延伸1 min,共計30個循環(huán).循環(huán)結(jié)束后在72℃延伸7 min,以保

3、證DNA延伸徹底.(2)利用12個隨機(jī)引物對70個品種楊的DNA樣品進(jìn)行了ISSR分析.共檢測到132個位點(diǎn),多態(tài)位點(diǎn)百分率在16.67﹪-59.85﹪之間,多態(tài)位點(diǎn)百分率最高的是荷蘭楊,最低的是小×胡.(3)70種楊樹分為兩大類群,第一群是由9個樣本組成的白楊派,其余品種構(gòu)成第二群.而第二群又分為兩個亞群,第一亞群又可分為4組,多數(shù)是由歐美楊各無性系組成的,第二亞群分為5組,多數(shù)由中國雜交育成的品種組成,同一系列的品種都能很好的聚在一