拮抗性芽孢桿菌F53抑制茄子黃萎病菌（Verticillium dahliae）的研究.pdf

1、本研究利用離體抑菌圈法從茄子病健植株根際土壤篩選出對(duì)黃萎病原菌(Verticilliumdahliae)抑菌效果明顯的芽孢桿菌F53菌株，對(duì)該菌株進(jìn)行發(fā)酵條件優(yōu)化試驗(yàn)，初步探討其發(fā)酵液的穩(wěn)定性、發(fā)酵液中抑菌活性物質(zhì)的性質(zhì)，對(duì)黃萎病原菌的抑菌機(jī)理及溫室人工接種黃萎病原菌的茄子幼苗盆栽試驗(yàn)，同時(shí)，通過(guò)生理生化試驗(yàn)及16SrDNA序列分析對(duì)菌株進(jìn)行鑒定。 在菌種篩選過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)F53菌株具有較強(qiáng)的平板抑菌能力，固體培養(yǎng)條件下能夠分泌幾

2、丁質(zhì)酶及β-1，3-葡聚糖酶。抑菌譜試驗(yàn)表明，該菌株抑菌范圍較廣，能夠?qū)Χ喾N所用指示菌株產(chǎn)生較明顯的抑制生長(zhǎng)作用。 為了獲得F53菌株的最佳發(fā)酵條件，通過(guò)碳、氮源正交試驗(yàn)及培養(yǎng)條件的優(yōu)化，得出最佳培養(yǎng)基配方為(％)：蔗糖0.3，玉米淀粉0.3，蛋白胨1.0，豆餅粉0.3，NaCl0.5，F(xiàn)eSO40.002，MgSO40.04；最佳培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)基起始pH值7.0～8.0、250mL三角瓶裝液量50mL、搖瓶速度150r/mi

3、n、接種量4％、溫度34℃，培養(yǎng)時(shí)間48h，這為該菌株的發(fā)酵罐放大試驗(yàn)提供了理論性依據(jù)。 發(fā)酵液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，該菌株發(fā)酵液熱、酸堿、蛋白酶及貯藏的穩(wěn)定性均較好，發(fā)酵液經(jīng)100℃處理100min，在pH3.0～10.0的條件下放置48h，蛋白酶K及胰蛋白酶處理一定時(shí)間，4℃冰箱中保存6個(gè)月，其抑菌活性基本不變。 發(fā)酵液分別用10％～100％飽和度(NH4)2SO4鹽析，(NH4)2SO4飽和度為70％時(shí)，所沉淀出來(lái)的