我國大豆主產(chǎn)區(qū)黑龍江省大豆及北京市大豆制品的轉(zhuǎn)基因成分檢測研究.pdf

1、鑒于轉(zhuǎn)基因大豆這種潛在風險，本研究對我國大豆主產(chǎn)區(qū)黑龍江省的田間大豆籽粒和北京市場的大豆制品豆腐進行了轉(zhuǎn)基因成分的PCR定性檢測，并對檢測結(jié)果進行了分析。　　對黑龍江省哈爾濱、黑河、佳木斯、雙鴨山、雞西地區(qū)的大豆田進行五點取樣，共采集210份檢測樣品。首先對DNA提取做了不同探討，對GMO試劑盒提取法和改良CTAB法提取DNA以及不同部位提取DNA質(zhì)量進行了分析比較?！　?yīng)用建立的定性PCR檢測技術(shù)體系對210份大豆樣品進行了CaM

2、V35s啟動子、Nos終止子、CP4-EPSPS目的基因的轉(zhuǎn)基因成分檢測，同時對檢測中所出現(xiàn)的不同陽性結(jié)果做了巢式PCR、酶切鑒定和擴增產(chǎn)物測序的確證試驗。研究表明：所有樣品中均沒有檢測到CaMV35S啟動子成分；在Nos引物擴增中，0x1樣品出現(xiàn)特異性擴增條帶，進一步酶切鑒定證明為陽性結(jié)果；有13個樣品在CP4-EPSPS基因檢測中雖擴增出類似陽性對照的條帶，但對PCR產(chǎn)物的進一步酶切鑒定表明，所有擴增結(jié)果為假陽性。利用巢式PCR對樣

3、品0x1的進一步分析表明，0x1樣品中不含有轉(zhuǎn)基因大豆RR成分。對0x1樣品用CP4-EPSPS引物擴增得到的片段進行測序，序列分析表明，該片段與CP4-EPSPS基因的同源性僅為81％。　　抽檢了北京市場上的雞蛋豆腐、內(nèi)酯豆腐、蔬菜豆腐、火鍋豆腐等不同類型和不同批次的50份樣品，運用所建立的PCR定性檢測體系進行了大豆內(nèi)參照基因Lectin、CaMV35s啟動子和CP4-EPSPS目的基因的檢測。結(jié)果表明，所抽檢的50份各類豆腐樣品