紫外線輻射角質(zhì)形成細(xì)胞導(dǎo)致皮膚光老化的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的:研究紫外線輻射對(duì)體外培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞的影響,包括對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖、凋亡和死亡的影響,以及與凋亡相關(guān)的bcl-2和Fas基因之間的關(guān)系;對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞分泌炎癥性細(xì)胞因子IL-6和表達(dá)核因子-κ B(NF-κ B)的影響;以及紫外線輻射后表皮角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子IL-6對(duì)真皮成纖維細(xì)胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-1和MMP-3的間接影響.研究具有抗氧化、抗炎作用的綠茶中的主要活性成分表沒食子兒茶酚沒食子酸酯(EGCG)對(duì)紫外線

2、輻射造成角質(zhì)形成細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.研究NF-κ B、表皮生長因子受體(EGF-R)反義寡核苷酸分別轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的表皮角質(zhì)形成細(xì)胞株HaCaT后,對(duì)紫外線誘導(dǎo)的表皮角質(zhì)形成細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6的抑制作用和轉(zhuǎn)錄因子c-jun活性的抑制作用.通過這一系列紫外線輻射對(duì)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞影響的研究,進(jìn)一步明確紫外線引起皮膚光老化的分子機(jī)制,以期探討防治紫外線引起皮膚光老化的新途徑.方法:MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡和死亡細(xì)胞數(shù)量以

3、及bcl-2蛋白水平的變化,ELISA方法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-6、Pro-MMP-1、MMP-3蛋白含量和c-jun DNA結(jié)合活性,半定量RT-PCR檢測(cè)mRNA的表達(dá)水平,免疫組化和Western Blot檢測(cè)細(xì)胞中NF-κBp65.結(jié)論:紫外線輻射對(duì)細(xì)胞具有明顯的損傷,小劑量UVB輻射可以誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡,大劑量UVB輻射則導(dǎo)致細(xì)胞死亡.紫外線輻射后,角質(zhì)形成細(xì)胞NF-κB激活,易位到細(xì)胞核,并且促進(jìn)IL-6的