幽門螺旋桿菌上調(diào)胃癌細(xì)胞中p16的表達(dá).pdf

1、目的：幽門螺旋桿菌感染是胃癌發(fā)生的重要因素之一，但其導(dǎo)致胃癌發(fā)生的具體機(jī)制并不清楚。P16基因是腫瘤發(fā)生中的重要基因，目前發(fā)現(xiàn)在胃癌中存在p16過表達(dá)現(xiàn)象。因此研究胃癌中p16的表達(dá)情況與幽門螺旋桿菌感染之間的關(guān)系有著重要意義。本試驗(yàn)的研究目的是觀察幽門螺旋桿菌是否能上調(diào)人胃癌細(xì)胞SGC-7901中p16蛋白的表達(dá)及作用機(jī)制。
　　方法：將幽門螺旋桿菌與SGC-7901細(xì)胞體外共培養(yǎng)不同濃度不同時間后：①，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)

2、變化；②, Western blot法檢測p16蛋白表達(dá)；③，RT-PCR檢測P16的mRNA表達(dá)水平；④，構(gòu)建P16啟動子序列片斷（900bp，358bp,155bp）⑤，質(zhì)脂體轉(zhuǎn)染質(zhì)粒；⑥，熒光素酶試驗(yàn)檢測P16的啟動子活性。
　　結(jié)果：①倒置顯微鏡下，胃癌SGC-7901細(xì)胞感染幽門螺旋桿菌后，細(xì)胞發(fā)生空泡樣變性。②Western blot法檢測結(jié)果顯示：隨著幽門螺旋桿菌濃度的增加，p16蛋白表達(dá)增強(qiáng)，當(dāng)MOI=100:1時

3、,p16蛋白表達(dá)達(dá)到高峰。③RT-PCR結(jié)果示幽門螺旋桿菌上調(diào)SGC-7901細(xì)胞的P16的mRNA水平。④熒光素酶試驗(yàn)檢測結(jié)果顯示幽門螺旋桿菌感染可以激活P16的啟動子活性。
　　結(jié)論：
　　1.幽門螺旋桿菌可導(dǎo)致胃癌細(xì)胞(SGC-7901)發(fā)生形態(tài)學(xué)改變。
　　2.幽門螺旋桿菌上調(diào)胃癌細(xì)胞(SGC-7901)p16蛋白的表達(dá)。
　　3.幽門螺旋桿菌上調(diào)胃癌細(xì)胞(SGC-7901)P16mRNA表達(dá)。