銀杉、秦嶺冷杉人工菌根誘導(dǎo)系的建立.pdf

1、本課題在現(xiàn)有的宏觀生態(tài)學(xué)研究的基礎(chǔ)上，以菌根學(xué)為主要研究方法并結(jié)合植物組織培養(yǎng)的技術(shù)，試圖通過使用最小量種子資源來誘導(dǎo)該兩種植物人工菌根的形成，驗證銀杉與秦嶺冷杉為典型的外生菌根植物的理論；建立人工菌根苗的誘導(dǎo)技術(shù)，進(jìn)行菌根功能的初步觀察。從而為從根本上解開其瀕危之謎，為尋找一條瀕危松科植物種群復(fù)壯的途徑提供有用的信息。本研究的具體結(jié)果如下： 1.運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)建立了銀杉及秦嶺冷杉無菌幼苗的培養(yǎng)系 經(jīng)70％酒精以及

2、30％H2O2的表面消毒，銀杉種子的無菌率可達(dá)100％；并且經(jīng)過切割1/5-1/3的胚乳，其種子發(fā)芽率達(dá)到60％以上；經(jīng)70％酒精、0.2％升汞溶液以及30％H2O2的多重表面消毒，秦嶺冷杉種子的無菌率也可達(dá)100％，其發(fā)芽率為30％。經(jīng)對多種植物培養(yǎng)基(WPM、SH、改良MS)進(jìn)行篩選和比較，確定了包含1/4MS大量元素、1/2MS微量元素、MS維生素及MS鐵鹽的改良MS(MMS)培養(yǎng)基為適合的基本培養(yǎng)基，在MMS培養(yǎng)基中添加0.2m

3、g/L的6-BA以及0.02mg/LNAA，有利于銀杉、秦嶺冷杉幼苗的生長。 2.成功地建立了兩種植物的人工菌根苗的誘導(dǎo)系 通過菌種以及菌根誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選，確定了土生空團(tuán)菌以及RM培養(yǎng)基的有效性；運(yùn)用改良平板法技術(shù)，分別建立了銀杉-土生空團(tuán)菌以及秦嶺冷杉-土生空團(tuán)菌的人工菌根誘導(dǎo)體系；運(yùn)用形態(tài)解剖學(xué)的研究技術(shù)，觀察并證實了在兩種植物的側(cè)根中存在明顯的菌套結(jié)構(gòu)以及在側(cè)根的皮層細(xì)胞間隙存在哈蒂氏網(wǎng)結(jié)構(gòu)。首次在實驗室水平上建