2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]:研究DcR3基因在原發(fā)性肺癌中的擴增和表達,初步探討該基因在原發(fā)性肺癌中過度表達的臨床意義。 [方法]: 1.利用DcR3單克隆抗體建立一種特異性強、靈敏度高、重復(fù)性好的BA-ELISA方法,用該方法檢測89例腫瘤患者、37例炎癥患者和29例健康體檢者的血清DcR3水平。 2.利用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測26例肺癌組織中DcR3的原位表達,明確肺癌患者血清中升高的DcR3來源。 3.提取26例新鮮肺

2、癌組織和5例健康體檢者外周血白細胞的基因組DNA,建立目的基因DcR3和內(nèi)參基因β-globin的定量PCR標準品和標準曲線,利用標準曲線相對定量方法檢測DcR3基因在肺癌組織的相對拷貝數(shù)。 [結(jié)果]: 1.DcR3包被抗體濃度為6μg/ml,生物素標記二抗稀釋度為1:500時,ELISA標準曲線線性關(guān)系最好,相關(guān)系數(shù)(r)為0.998,標準差(SD)為0.028,回歸方程為:y=1.03+0.66lgx。該方法批內(nèi)和批

3、間變異系數(shù)均低于10%,平均回收率為96%。 2.59.6%(53/89)的腫瘤患者血清DcR3水平升高,3.4%(1/29)的健康體檢者和8.1%(3/37)的炎癥患者血清DcR3水平升高(P<0.05)。46.2%的肺癌患者血清DcR3水平升高(P<0.05)。 3.65.4%(17/26)的肺癌組織免疫組化細胞漿染色陽性,23.1%(6/26)的肺癌組織細胞核染色陽性(包括鱗癌、腺鱗癌、大細胞癌、肺泡癌各1例,腺癌

4、2例)。T3~T4組免疫組化評分高于T1~T2組(P=0.002);N2~N3組免疫組化評分高于N0~N1組(P=0.025);M1組免疫組化評分高于M0組(P=0.041);Ⅲ~Ⅳ期免疫組化評分高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.001)。免疫組化評分高的肺癌患者血清DcR3水平高(P<0.05)。 4.DcR3基因和β-globin基因標準品的定量PCR標準曲線線性關(guān)系好,R2分別為0.998和0.996,斜率分別為-3.73和-3.87

5、,擴增效率分別為85.4%和81.1%。 5.26例肺癌組織中DcR3基因的擴增倍數(shù)在0.46~5.01之間,平均值為1.87±1.25,38.5%(10/26)的肺癌組織DcR3基因擴增倍數(shù)超過2。 [結(jié)論]: 1.本研究在國內(nèi)首次成功建立檢測血清DcR3的BA-ELISA方法,該方法特異性強、靈敏性高、重復(fù)性好,為DcR3的進一步研究提供了一種新的思路。 2.肺癌組織中存在DcR3基因的過度表達,并且

6、呈現(xiàn)腫瘤細胞特異性。肺癌組織中DcR3的高表達與腫瘤大小、侵襲、轉(zhuǎn)移、臨床分期呈正相關(guān)。血清升高的DcR3來源于肺癌細胞。 3.部分肺癌組織免疫組化顯示DcR3細胞核染色,說明DcR3可能同時是一種轉(zhuǎn)錄因子,對其它腫瘤相關(guān)基因發(fā)揮調(diào)控作用。 4.本研究在國內(nèi)首次成功建立了用于熒光定量PCR的目的基因DcR3和內(nèi)參基因β-globin的標準品和標準曲線。 5.原發(fā)性肺癌同時存在DcR3基因擴增和過度表達,DcR3基

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