應用ISSR技術和觀賞性狀變異特性篩選蝴蝶蘭雜交親本.pdf

1、雜交育種是蝴蝶蘭主要的育種手段，但有關蝴蝶蘭雜交親本篩選依據(jù)的研究甚少。目前，蝴蝶蘭新品種的選育往往是憑經(jīng)驗盲目的去選擇親本，缺乏科學有效的評價依據(jù)和手段，許多優(yōu)良組合漏選，雜交育種效率低。為此，開展蝴蝶蘭雜交親本篩選依據(jù)研究，了解各觀賞性狀的變異特性和遺傳潛力，減少育種工作中親本選配的盲目性，以獲得具有較高經(jīng)濟價值的觀賞性狀或雜交組合，提高育種效率具有重要的意義。
　　本文通過調(diào)查福建地區(qū)蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀，總結了蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)面臨的危

2、機。同時，從ISSR分子標記和觀賞性狀變異特性兩個方面研究了篩選蝴蝶蘭雜交親本的依據(jù)。主要研究結果如下：
　　1.通過實地調(diào)查和數(shù)據(jù)、文獻分析，總結出福建地區(qū)蝴蝶蘭產(chǎn)業(yè)面臨的危機，表現(xiàn)為：供需失衡，種苗產(chǎn)量過大；種苗市場混亂，缺乏品質(zhì)保障；缺乏良好的品種選育體系，品種結構單一。
　　2.從DNA產(chǎn)量和質(zhì)量，以及經(jīng)濟性和操作性四個方面綜合對比分析了改良CTAB法、改良SDS法、高鹽低pH法和試劑盒法在提取蝴蝶蘭基因組DNA中的

3、優(yōu)勢和不足，得出最適宜的提取蝴蝶蘭基因組DNA的方法為改良CTAB法。
　　3.利用性狀差異較大的兩個蝴蝶蘭樣品進行PCR擴增的單因素試驗，逐一篩選ISSR反應條件，再通過正交試驗，建立了蝴蝶蘭ISSR-PCR最優(yōu)反應體系。挑選不同花色的蝴蝶蘭代表資源從100個ISSR引物中篩選出10個多態(tài)引物，并確定了最佳退火溫度。根據(jù)Jaccard相異系數(shù)，對82份蝴蝶蘭資源進行聚類分析。結果表明，聚類情況與形態(tài)學特征有一定的關系，但遺傳聚類

4、組的劃分與花色等性狀并未見必然的聯(lián)系。
　　4.通過ISSR分子標記技術，可以進行蝴蝶蘭種質(zhì)資源親緣關系的分析，根據(jù)ISSR分析的結果指導雜交親本的選配工作。選擇親緣關系較遠的材料，有利于增加后代的遺傳變異，選育出雜交優(yōu)勢強、綜合性狀較好的優(yōu)良品種。本實驗82份蝴蝶蘭種質(zhì)資源兩兩間的GS值在0.210~0.811之間，說明品種間的遺傳距離較大，如果作為親本進行雜交，能獲得更大的分離群體供選擇。例如本試驗中蝴蝶蘭2096和2094都

5、為白色花瓣，其遺傳相似系數(shù)為0.411，可以嘗試進行雜交，以期獲得優(yōu)良淺色系的品種。
　　5.對比2047×2058和2109×2084兩組蝴蝶蘭雜交組合可以看出，父母本之間性狀差異越大，子代發(fā)生變異的概率越高，變異的類型也更加豐富，有可能獲得新奇品種。F1代在葉形、花翼瓣排列方式、花序長度等方面的變異系數(shù)較大，表明 F1代在葉形、花翼瓣排列方式、花序長等觀賞性狀方面比雙親有更大的變異，是 F1代選擇優(yōu)良單株的重要依據(jù)。從雜種優(yōu)勢

6、和相對遺傳力分析來看，兩組雜交組合 F1代表現(xiàn)的優(yōu)勢性狀和相對遺傳力分析結果不同，表明雜種優(yōu)勢性狀和相對遺傳力分析較為復雜，需要進一步研究。
　　6.分析雜交組合2047×2058，母本2047性狀分離情況可以發(fā)現(xiàn)：F1代翼瓣和萼瓣顏色主要受母本影響。結合臺灣糖業(yè)研究所的研究結果，推測蝴蝶蘭紅色花色對白色花色是顯性，紅花花瓣和萼瓣受同一對基因控制。另外，兩組雜交組合F1代中央裂片頂端形狀和翼瓣形狀都與父本保持一致，推測中央裂片頂端

7、形狀和翼瓣形狀兩個性狀主要受父本影響。
　　7.通過調(diào)查21個親本和用這些親本配制的203個F1代的主要觀賞性狀，并整理數(shù)據(jù)。本試驗以F1代花朵數(shù)作為因變量為例，親本的冠幅、葉數(shù)、葉長寬、花序長度、花梗長、花縱徑、花橫徑、翼瓣花色類型等性狀作為自變量，利用SAS統(tǒng)計軟件做逐步回歸分析，建立了F1代花朵數(shù)和親本主要性狀的線性回歸預測模型：
　　B7_1=12.885+0.267*B13_2+1.047*B14_2+1.187*