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1、不同的培養(yǎng)基影響蝴蝶蘭外植體褐變的發(fā)生,該實驗中蝴蝶蘭外植體在MS紙橋培養(yǎng)基上褐變率最低,1/2MS次之,MS、B5和N6培養(yǎng)基上蝴蝶蘭外植體褐變率相同.無激素培養(yǎng)基使外植體黃化.MS培養(yǎng)基中鐵鹽加倍和微量元素缺乏造成外植體嚴重褐變,培養(yǎng)基積累很多褐色物質(zhì);微量元素加倍使褐變減輕;瓊脂含量減少,外植體褐變加重.增加光照強度外植體褐變嚴重,黑暗培養(yǎng)的外植體褐變發(fā)生推遲而且程度輕.培養(yǎng)基添加AA外植體褐變與對照沒有明顯差別;添加了2000m
2、g/L或1000mg/L AC的培養(yǎng)基,都能使外植體黃化;培養(yǎng)基中加入檸檬酸的外植體褐變比對照輕.外植體在添加了PVP的培養(yǎng)基中褐變情況與對照相同,但培養(yǎng)基中褐色成分沒有擴散.蝴蝶蘭外植體在培養(yǎng)的第5天開始發(fā)生褐變,PPO和POD活力在褐變發(fā)生前期都升高,褐變發(fā)生后酶活力開始下降.同工酶譜分析,培養(yǎng)2天POD酶譜有四條酶帶出現(xiàn),隨培養(yǎng)天數(shù)的延長,除了酶帶強弱不同外,沒有明顯的變化.PPO同工酶譜略有變化,遷移率為0.42的酶帶活性較強,
3、在褐變過程中一直出現(xiàn).蝴蝶蘭外植體褐變過程中,總酚含量隨外植體褐變增強而逐漸增加,PAL活力與總酚含量變化基本一致.葉綠素a和b含量卻逐漸降低,與外植體的顏色變化相符.PAL參與了褐變發(fā)生過程.蝴蝶蘭外植體褐變發(fā)生過程中,CAT和SOD活力在培養(yǎng)初期開始下降,外植體褐變后活力逐漸有小幅度升高,但總體水平比對照低.MDA含量在培養(yǎng)第2天高于對照兩倍,隨后一直維持較高的水平.外植體發(fā)生褐變時膜脂發(fā)生過氧化,膜的完整性被破壞.掃描電鏡觀察蝴蝶
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