三種經(jīng)濟絨螯蟹的遺傳學(xué)和形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、本文以分布于中國大陸的中華絨螯蟹群體、合浦絨螯蟹群體和日本境內(nèi)的日本絨螯蟹群體為研究對象，采用同工酶電泳和mtDNA測序技術(shù)，進行了絨螯蟹群體的遺傳學(xué)研究；并結(jié)合形態(tài)學(xué)多變量分析初步探討了絨螯蟹屬上述幾種蟹類的親緣關(guān)系。主要研究結(jié)果如下： 1、建立了適合于絨螯蟹同工酶分析的水平淀粉凝膠電泳系統(tǒng)；在該電泳系統(tǒng)下檢測到11種同工酶，分別為AAT、GPI、G3PDH、HK、IDHP、LDH、LAP、MDH、MPI、PGDH、SOD；對

2、上述11種同工酶進行了生化遺傳分析。 2、在分析的11種同工酶中，共記錄到17個基因位點，分別是：AAT-1*、AAT-2*、GPI*、G3PDH*、HK*、IDHP-1*、IDHP-2*、LDH*、LAP-1*、LAP-2*、MDH-1*、MDH-2*、MPI-1*、MPI-2*、PGDH*、SOD-1*、SOD-2*。其中在中華絨螯蟹群體中，AAT-1*、AAT-2*、GPI*、G3PDH*、IDHP-1*、IDHP-2*、

3、MDH-1*、MDH-2*等8個位點為多態(tài)位點；在合浦絨螯蟹群體中，AAT-1*、AAT-2*、GPI*、IDHP-1*、MDH-1*、MDH-2*等6個位點為多態(tài)位點；在日本絨螯蟹群體中，只有AAT-1*、AAT-2*、GPI*、IDHP-1*等4個位點為多態(tài)位點。 3、中華絨螯蟹群體、合浦絨螯蟹群體、日本絨螯蟹群體的有效等位基因數(shù)、實際雜合度、預(yù)期雜合度、多態(tài)位點比例分別為：1.0815、0.0384、0.0871、47.0

4、6％；1.0551、0.0433、0.0861、35.29％和1.0337、0.0252、0.0451、17.65％。上述三種絨螯蟹群體的實際雜合度低于預(yù)期雜合度，并且其實際雜合度普遍較低。 4、中華絨螯蟹群體與合浦絨螯蟹群體、中華絨螯蟹群體與日本絨螯蟹群體、合浦絨螯蟹群體與日本絨螯蟹群體間的遺傳距離分別為0.0010、0.0027、0.0016。中華絨螯蟹群體與合浦絨螯蟹群體之間的遺傳距離最小，表明兩者的親緣關(guān)系較近。

5、 5、根據(jù)蚤狀溞、鹵蟲及果蠅序列設(shè)計了絨螯蟹線粒體DNA12SrRNA和ND2基因片段的引物，并進行了PCR擴增，得到清晰的基因片段。 6、線粒體DNA12SrRNA基因片段序列分析表明，中華絨螯蟹群體、合浦絨螯蟹群體及其他日本絨螯蟹群體該基因序列長度相同，為416bp；沖繩絨螯蟹群體該序列長度為417bp。堿基含量相似，A、T、G、C的平均含量分別為34.9％、40.0％、10.6％、14.4％。群體內(nèi)有0-2個堿基差異，變異

6、率為0-0.48％，群體間有2-11個堿基差異，變異率為0.48-2.63％。 線粒體DNAND2基因片段序列分析表明，中華絨螯蟹群體、合浦絨螯蟹群體、其他日本絨螯蟹群體及沖繩絨螯蟹群體該基因序列長度相同，均為376bp；堿基含量相似，A、T、G、C的平均含量分別為29.4％、44.7％、7.1％、18.8％。密碼子的使用頻率不同，偏好使用第三位為A或者T的密碼子，而第三位為G的密碼子幾乎不用。 7、線粒體DNA12Sr

7、RNA基因片段分析表明，群體內(nèi)的最大遺傳距離為0.72％，群體間的最大遺傳距離為2.4％。線粒體DNAND2基因片段分析表明，群體內(nèi)的最大遺傳距離為0.80％，群體間的最大遺傳距離為3.99％。系統(tǒng)發(fā)育分析表明，沖繩絨螯蟹群體處在一個非常顯著的位置上，單獨聚為一支；中華絨螯蟹群體、合浦絨螯蟹群體及其他日本絨螯蟹群體也各自聚為獨立的一支。 8、形態(tài)學(xué)個體聚類分析表明，三種絨螯蟹分成完全獨立的三個組，各組分別代表一個獨立的種群，不同

8、種群的個體之間不出現(xiàn)個體交叉的現(xiàn)象；而日本絨螯蟹兩個群體的個體相互有交叉，不能被完全分開。中華絨螯蟹與合浦絨螯蟹首先聚在一起，說明兩者的親緣關(guān)系較近。 9、單因子方差分析結(jié)果顯示，中華絨螯蟹與合浦絨螯蟹之間有10個變量(C/B、D/A、F/A、G/A、H/I、J/A、K/A、M/L、M/N、O/P)存在顯著差異，中華絨螯蟹與日本絨螯蟹之間有10個變量(C/B、E/A、F/A、G/A、H/I、J/A，K/A、M/L、M/N、O/P