聚乳酸乳牙根管樁的生物相容性及臨床應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、嚴(yán)重嬰幼兒齲造成的殘根殘冠修復(fù)治療目前仍是臨床治療難題。恒牙殘根殘冠的治療通常應(yīng)用金屬或纖維樁（核）利用根管增強(qiáng)固位，以恢復(fù)牙體的形態(tài)和功能，但由于不能吸收，用于乳牙殘根殘冠的修復(fù)則會(huì)影響乳恒牙的替換。乳恒牙替換是兒童時(shí)期發(fā)生一種的特殊生理現(xiàn)象，隨著恒牙胚的發(fā)育，乳牙到一定時(shí)期牙根會(huì)逐漸吸收，由萌出的恒牙所代替。由于乳恒牙替換，在嚴(yán)重齲蝕乳牙的根管內(nèi)固定修復(fù)治療時(shí)必須要考慮到是否對(duì)恒牙的萌出造成影響。國內(nèi)文獻(xiàn)顯示大多數(shù)乳牙殘根殘冠通常選

2、擇對(duì)癥治療或拔除，但是保守治療不僅影響患兒美觀和發(fā)育，更嚴(yán)重的是影響后繼恒牙的正常萌出和頜骨的生長(zhǎng)發(fā)育，成為錯(cuò)頜畸形的發(fā)生誘因。為解決這一問題，選擇合適的根管內(nèi)固定裝置對(duì)嚴(yán)重齲壞乳牙進(jìn)行形態(tài)、功能以及符合生理特點(diǎn)的修復(fù)是兒童口腔科醫(yī)生需要解決的重要課題。近來醫(yī)用生物可吸收材料開始應(yīng)用于臨床治療，如骨科的固定裝置及外科的支架材料。生物可吸收材料具有良好的組織相容性、一定的可塑性和機(jī)械性能、適當(dāng)?shù)纳锟山到庑阅?，用于治療或替換人體的組織和器

3、官，增強(qiáng)功能或促進(jìn)愈合。而聚乳酸因?yàn)榫邆鋬?yōu)良的理化及生物學(xué)性能而成為研究最多的材料。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)原創(chuàng)性的聚乳酸可吸收根管樁進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)相容性實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)探討乳牙專用可吸收根管樁的應(yīng)用可行性，進(jìn)而通過對(duì)其臨床應(yīng)用于嬰幼兒齲患兒進(jìn)行觀察和評(píng)估，探討乳牙殘根殘冠功能修復(fù)的臨床療效，為嬰幼兒齲的治療提供一種新的治療方法，為規(guī)范可吸收根管樁的臨床應(yīng)用奠定一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　實(shí)驗(yàn)一聚乳酸根管樁生物相容性的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究
　　本實(shí)

4、驗(yàn)首先利用聚乳酸材料制作生物可吸收根管樁，進(jìn)而制備不同濃度聚乳酸根管樁的浸提液。體外分離和培養(yǎng)與乳恒牙替換生理過程密切相關(guān)的牙囊細(xì)胞、乳牙牙周膜細(xì)胞及乳牙牙髓細(xì)胞，并采用免疫組化方法初步鑒定細(xì)胞。進(jìn)而通過將相應(yīng)濃度聚乳酸根管樁浸提液加入３種細(xì)胞的培養(yǎng)基孵育一定時(shí)間，采用組織學(xué)方法、MTT分析、流式細(xì)胞技術(shù)觀察和檢測(cè)牙囊細(xì)胞、乳牙牙周膜細(xì)胞、乳牙牙髓細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，細(xì)胞毒性反應(yīng)及凋亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：加入聚乳酸根管樁浸提液的實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)

5、照比較，細(xì)胞形態(tài)未見明顯異常，生長(zhǎng)情況良好；細(xì)胞毒性評(píng)估顯示實(shí)驗(yàn)組各濃度組的細(xì)胞毒性級(jí)別均為1級(jí)，與陰性對(duì)照組無顯著差異；流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組早期凋亡和晚期凋亡，凋亡指數(shù)與陰性對(duì)照組之間無明顯差別。其次利用不同濃度的聚乳酸根管樁浸提液，注射隨機(jī)分組的昆明小鼠腹腔內(nèi)，同時(shí)設(shè)置生理鹽水注射的動(dòng)物為對(duì)照組。觀察和記錄小鼠的急性毒性行為反應(yīng)，進(jìn)而通過白介素-1（IL-1）定量酶聯(lián)檢測(cè)（Elisa）方法分析實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清中炎性因子活性的變化，

6、此外常規(guī)組織學(xué)方法制備小鼠肝臟標(biāo)本,切片HE染色后觀察肝細(xì)胞對(duì)聚乳酸材料的毒性反應(yīng)。結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組小鼠均無明顯急性毒性行為反應(yīng)；血清中炎性分子IL-1活性分析，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間無顯著差異；肝臟組織學(xué)觀察未見明顯細(xì)胞腫脹或壞死、充血、炎細(xì)胞浸潤等異常。綜合上述結(jié)果提示，制備的聚乳酸根管樁對(duì)人乳恒牙替換相關(guān)細(xì)胞的生物學(xué)行為無明顯影響，具有良好的生物相容性，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無生物毒性作用，符合生物安全性要求，可以用于進(jìn)一步臨床研究。
　　

7、實(shí)驗(yàn)二聚乳酸根管樁應(yīng)用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
　　本實(shí)驗(yàn)以3月齡的幼犬做為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，利用聚乳酸根管樁，選擇犬乳前牙制備根管內(nèi)固定修復(fù)的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀６ㄆ谕ㄟ^詳細(xì)口腔檢查，觀察修復(fù)后乳牙的牙體和牙周組織的臨床表現(xiàn)以及修復(fù)體的情況，放射線檢查牙根尖周組織的變化。2個(gè)月后，無痛處死實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛣?dòng)物，切取包含乳牙及恒牙胚的頜骨組織樣本，常規(guī)方法制備標(biāo)本，組織學(xué)切片及HE染色觀察聚乳酸根管樁對(duì)乳牙根吸收和繼承恒牙胚萌出的影響，以及乳牙根尖周組織的生物學(xué)反應(yīng)

8、。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)：以聚乳酸根管樁為內(nèi)固定裝置修復(fù)的犬乳前牙，未見明顯病理性牙體松動(dòng)、牙齦充血、牙周膿腫等臨床異常表現(xiàn)，牙體修復(fù)物完好；X線片檢測(cè)乳牙根尖周膜腔清晰，未見異常的炎性陰影及病理性吸收，其下方的恒牙胚發(fā)育正常；組織學(xué)染色發(fā)現(xiàn)修復(fù)乳牙的牙根出現(xiàn)生理性吸收，繼承的恒牙胚逐漸正常萌出，乳恒牙替換的進(jìn)度與健康對(duì)照牙齒無明顯差異，乳牙根尖周組織未見明顯組織結(jié)構(gòu)紊亂、毛細(xì)血管充血、炎細(xì)胞浸潤、組織壞死等異常病理表現(xiàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示聚乳酸根

9、管樁進(jìn)行內(nèi)固定修復(fù)的應(yīng)用對(duì)乳恒牙的生理性替換無明顯影響。
　　實(shí)驗(yàn)三聚乳酸根管樁臨床應(yīng)用試驗(yàn)的初步研究
　　本實(shí)驗(yàn)采用SmartPinTM醫(yī)用生物可吸收棒（Linvatec，F(xiàn)inland）作為乳牙修復(fù)的臨床試驗(yàn)材料，它是通過獨(dú)特的拉絲編織專利技術(shù)合成出具有高強(qiáng)度和堅(jiān)韌特點(diǎn)的聚乳酸聚合物。首先將直徑為2mm的Smart Pin TM醫(yī)用生物可吸收棒通過無菌切割方法制備成長(zhǎng)度為10mm的根管樁，無菌常溫保存待用。臨床研究對(duì)象選

10、擇適應(yīng)證為上頜乳前牙嚴(yán)重齲壞且常規(guī)治療手段無法修復(fù)的3～4歲患兒48名，共100個(gè)牙齒。在知情同意的前提下，首先通過傳統(tǒng)根管治療方法對(duì)殘根殘冠進(jìn)行治療和處理，而后根管內(nèi)植入和粘結(jié)聚乳酸根管樁，在其基礎(chǔ)上復(fù)合樹脂粘結(jié)修復(fù)牙冠，完成治療?；純喊肽甓ㄆ趶?fù)查，通過臨床檢查方法和利用USPHS&Ryge評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，觀察和分析聚乳酸根管樁用于修復(fù)乳前牙殘根、殘冠的成功率及修復(fù)效果；而采用放射學(xué)檢查方法，觀察和分析修復(fù)乳牙可能出現(xiàn)的臨床后遺癥或并發(fā)癥（