疏經(jīng)防痛膠囊安全性、主要藥理作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　疏經(jīng)防痛膠囊是導(dǎo)師治療痛經(jīng)的經(jīng)驗(yàn)方,由經(jīng)方(四逆散)加味而成,具有養(yǎng)血益肝、行氣助用、祛瘀止痛之功效,臨床應(yīng)用療效顯著。為了評(píng)價(jià)疏經(jīng)防痛膠囊的安全性,闡明其療效,進(jìn)一步揭示疏經(jīng)防痛膠囊治療痛經(jīng)的作用機(jī)制,本文根據(jù)其功能和主治,對(duì)疏經(jīng)防痛膠囊進(jìn)行了毒理學(xué)及主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。同時(shí),采用雌激素和縮宮素誘發(fā)大鼠原發(fā)性痛經(jīng)模型,初步探討其治療痛經(jīng)的作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用及進(jìn)一步將其開發(fā)成為治療原發(fā)性痛經(jīng)的新藥提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依

2、據(jù)。
　　方法:
　　1毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)
　　按最大濃度、最大給藥容量0.4ml/10g體重,灌胃給藥,1次/天,觀察疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)小鼠的急性毒性作用。
　　2鎮(zhèn)痛抗炎作用的實(shí)驗(yàn)
　　把符合各實(shí)驗(yàn)要求的大、小鼠隨機(jī)分為六組,分別為空白對(duì)照組、疏經(jīng)防痛膠囊高、中、低劑量組、以消炎痛作為西藥陽性對(duì)照藥,以田七痛經(jīng)膠囊作為中藥陽性對(duì)照藥,給藥途徑均為灌胃給藥。采用熱板法和扭體法來觀測(cè)疏經(jīng)防痛膠囊的鎮(zhèn)痛作用。采用對(duì)二甲苯

3、致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)和蛋清致大鼠足爪腫脹實(shí)驗(yàn)來觀測(cè)疏經(jīng)防痛膠囊的抗炎作用。
　　3疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠的影響
　　通過大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇注射液增加子宮對(duì)縮宮素的敏感性,腹腔注射催產(chǎn)素造大鼠痛經(jīng)模型。觀察并記錄給催產(chǎn)素后30min內(nèi)大鼠扭體反應(yīng)發(fā)生的次數(shù)。在給予催產(chǎn)素1h后,處死大鼠,取同側(cè)同位段新鮮子宮,用放免法檢測(cè)PGF2a、PGE2的含量。并在光鏡下觀察各組大鼠子宮組織病理形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)果:

4、　　1急性毒性實(shí)驗(yàn):疏經(jīng)防痛膠囊給藥后體重與空白對(duì)照組比較,P>O.05,無顯著性差異。給藥后觀察期間,與空白組比較,各組小鼠未出現(xiàn)任何異常反應(yīng),無一只動(dòng)物死亡,尸檢肉眼觀察內(nèi)臟器官無異常變化。實(shí)驗(yàn)中測(cè)定小鼠1日內(nèi)的最大給藥量為50g/kg,相當(dāng)于臨床擬用人日常用量的110倍。表明在此劑量下灌胃對(duì)小鼠是安全的。
　　2鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn):(1)熱板法:與空白組相比,在觀測(cè)的各時(shí)間段,各給藥組均能提高小鼠的痛閾值。其中疏經(jīng)防痛膠囊高劑量組、消

5、炎痛組極顯著提高給藥后小鼠的痛閾值(P<0.001),疏經(jīng)防痛膠囊中劑量組顯著提高給藥后小鼠的痛閾值(P<0.01),田七痛經(jīng)膠囊、疏經(jīng)防痛膠囊低劑量組均能提高給藥后小鼠的痛閾值(P﹤0.O5或P﹤0.O1)。
　　(2)扭體法:與空白對(duì)照組相比,各給藥組均能明顯減少醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)的次數(shù),均有顯著性差異。其中疏經(jīng)防痛膠囊高、中劑量組可顯著減少小鼠扭體次數(shù)(P<0.001、P<0.01)。疏經(jīng)防痛膠囊各劑量組的扭體抑制率均高

6、于田七痛經(jīng)膠囊組,且隨著藥量得增加,其扭體抑制率升高。
　　3抗炎作用實(shí)驗(yàn):(1)小鼠耳廓腫脹法:與空白對(duì)照組相比,疏經(jīng)防痛膠囊各劑量組對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹均有明顯的抑制作用。其中高劑量、中劑量組顯著抑制小鼠耳腫脹(P<0.001、P<0.01),疏經(jīng)防痛膠囊各劑量腫脹抑制率均高于田七痛經(jīng)膠囊組,并且腫脹抑制率隨劑量增加而遞增。(2)大鼠足跖腫脹法:與空白組比較,疏經(jīng)防痛膠囊各劑量組對(duì)大鼠足跖腫脹均有顯著的抑制作用(P﹤0.0

7、1或 P<0.05)。
　　4疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠的影響
　　(1)疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠扭體反應(yīng)的影響
　　與模型組比較,田七組與疏經(jīng)防痛膠囊組能明顯降低大鼠30min內(nèi)扭體次數(shù),具有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。其中,疏經(jīng)防痛膠囊和田七痛經(jīng)膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠發(fā)生扭體的抑制率分別為67.21％,48.74%。
　　(2)疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠子宮內(nèi)膜組織病理形態(tài)學(xué)的影響
　　給藥

8、組間的病理組織學(xué)改變無顯著差別,與模型組相比,疏經(jīng)防痛膠囊和田七組痛經(jīng)膠囊組病變程度較為輕微。疏經(jīng)防痛膠囊可使痛經(jīng)模型大鼠子宮內(nèi)膜組織水腫減輕,固有層厚度變薄,腺體分泌細(xì)胞增多,螺旋動(dòng)脈數(shù)量減少。
　　(3)疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠子宮內(nèi)膜組織PGF2a表達(dá)的影響
　　與空白組比較,模型組有顯著增加PGF2a表達(dá)的面積總和、平均光密度、平均黑度均值、積分光密度總和(P<0.01)。與模型組相比,疏經(jīng)防痛膠囊組和田七痛經(jīng)膠囊

9、組可降低PGF2a表達(dá)。疏經(jīng)防痛膠囊組極顯著降低了PGF2a的面積總和、平均光密度、平均黑度均值、積分光密度總和(P<0.01)。
　　(4)疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠子宮內(nèi)膜組織PGF2a/PGE2比值表達(dá)的影響
　　與空白組比較,模型組有顯著增加PGF2a/PGE2比值表達(dá)的面積總和、平均光密度、平均黑度均值、積分光密度總和(P<0.01)。與模型組比較,疏經(jīng)防痛膠囊組和田七痛經(jīng)膠囊組有顯著降低PGF2a/PGE2比值表

10、達(dá)的面積總和、平均光密度、平均黑度均值、積分光密度總和(P<0.01)。
　　(5)疏經(jīng)防痛膠囊對(duì)痛經(jīng)模型大鼠子宮內(nèi)膜組織PGE2表達(dá)的影響
　　與空白組比較,模型組有顯著增加PGE2表達(dá)的面積總和、平均光密度、平均黑度均值、積分光密度總和(P<0.01或P<0.05)。與模型組比較,疏經(jīng)防痛膠囊組顯著增加了PGE2表達(dá)的面積總和、平均光密度、平均黑度均值、積分光密度總和(P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.毒

11、理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明小鼠1日內(nèi)的最大給藥量為50g/kg,相當(dāng)于臨床擬用人日常用量的110倍,無一只動(dòng)物死亡,尸檢肉眼觀察內(nèi)臟器官無異常變化。說明在此劑量下灌胃對(duì)小鼠是安全的。
　　2.疏經(jīng)防痛膠囊具有顯著的鎮(zhèn)痛抗炎作用,并存在一定的量效關(guān)系。
　　3.疏經(jīng)防痛膠囊明顯減少痛經(jīng)模型大鼠扭體次數(shù),進(jìn)一步說明其具有鎮(zhèn)痛解痙作用。
　　4.疏經(jīng)防痛膠囊可使痛經(jīng)模型大鼠子宮內(nèi)膜組織水腫減輕,固有層厚度變薄,腺體分泌細(xì)胞增多,螺旋動(dòng)脈數(shù)