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1、[目的]: 1.建立SD大鼠變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis,AR)動(dòng)物模型,觀察其速發(fā)相及遲發(fā)相變化,并觀察鼻黏膜的組織學(xué)變化。 2.研究腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受體TrkB在實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性鼻炎鼻黏膜中的表達(dá)情況,并探討它們與變應(yīng)性鼻炎之間的關(guān)系。 [方法]: 30只健康SD大鼠被隨機(jī)分為正常對(duì)照組10只和變應(yīng)性鼻炎組(AR組)2
2、0只,其中AR組又被隨機(jī)分為激發(fā)后30分鐘組(速發(fā)相反應(yīng)組,AR1組)10只和激發(fā)后9小時(shí)組(遲發(fā)相反應(yīng)組,AR2組)10只。AR模型的建立方法:首先在SD大鼠的腹腔注入卵清蛋白和氫氧化鋁的混合液進(jìn)行基礎(chǔ)致敏,然后再向鼻腔滴入5%卵清蛋白溶液進(jìn)行激發(fā)。用HE及甲苯胺藍(lán)染色方法觀察變應(yīng)性鼻炎鼻黏膜中嗜酸性粒細(xì)胞、上皮下腺體及肥大細(xì)胞等組織學(xué)改變;用免疫組織化學(xué)(Envision二步法)分別檢測(cè)BDNF及TrkB在鼻黏膜中的表達(dá)和變化;利用
3、反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)鼻黏膜中。BDNFmRNA的表達(dá)及變化情況。 [結(jié)果]: 1.HE及甲苯胺藍(lán)染色顯示:相比正常對(duì)照組,AR1、AR2組大鼠鼻黏膜均表現(xiàn)為鼻黏膜結(jié)構(gòu)被破壞,腺體增生,鼻黏膜微血管擴(kuò)張、增生,肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn),其中AR2組腺體增生及嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)更明顯。 2.免疫組織化
4、學(xué):BDNF主要表達(dá)于鼻黏膜上皮細(xì)胞、腺細(xì)胞和固有層-些炎性細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi),以及部分腺細(xì)胞胞核內(nèi);TrkB主要表達(dá)于鼻黏膜上皮細(xì)胞、腺細(xì)胞及某些炎性細(xì)胞的胞質(zhì)及胞膜。AR1組、AR2組和正常對(duì)照組鼻黏膜中BDNF的積分光密度(iOD)值分別為83583.12±29843.21、8607.10±23728.03和56888.77±14879.07,AR1、AR2組與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),AR1組與AR2組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意
5、義(P>0.05);AR1組、AR2組和正常對(duì)照組鼻黏膜中TrkB的iOD值分別為89741.84±9147.77、98043.46±21561.14及71525.57±14957.62,AR1、AR2組與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),AR1組與AR2組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);BDNF及TrkB蛋白表達(dá)水平在AR1組、AR2組顯著高于正常對(duì)照組,且BDNF與TrkB有相關(guān)性(P<0.05),相關(guān)系數(shù)為0.593。
6、 3.RT-PCR:AR1組、AR2組和正常對(duì)照組鼻黏膜中BDNF相對(duì)密度分別為0.48±0.13、0.53±0.09及0.29±0.02。AR1、AR2組與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),AR1組與AR2組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 [結(jié)論]: 變應(yīng)性鼻炎速發(fā)相及遲發(fā)相的病理改變有相似之處,如腺體增生、血管擴(kuò)張等。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及其受體TrkB蛋白表達(dá)在速發(fā)相及遲發(fā)相反應(yīng)時(shí)較正常對(duì)照組均有明顯增高,提示
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