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文檔簡介
1、目的:1、研究貧鈾所引起的人支氣管上皮細胞急性毒性、氧化損傷、遺傳毒性的及其機理。2、研究二甲基亞砜對貧鈾損傷的防護作用及其機理,為貧鈾損傷的醫(yī)學(xué)防護提供依據(jù)。 方法:以人支氣管上皮細胞(BEAS-2B)為研究對象,采用難溶性貧鈾對細胞進行染毒,以DMSO為保護劑,通過分光光度法及熒光光度法測量細胞內(nèi)外活性氧的濃度,細胞抗氧化酶活性的變化,以細胞內(nèi)酶的逸出、ATP酶活性的變化來證實細胞膜損傷,以研究貧鈾對細胞的急性毒性作用及DM
2、SO對貧鈾毒性的抑制作用及其機制。采用慧星實驗、hprt基因突變檢測、測量微核多核率、細胞染色體分析來研究貧鈾對細胞的遺傳毒性作用及DMSO對其毒性的抑制作用。 結(jié)果1、0.5~2.5mg/mlDU作用于BEAS-2B細胞后,細胞內(nèi)外的活性氧均增高,在貧鈾濃度為2.0mg/ml時達到峰值,細胞上清超氧陰離子為33.43μmol/L、過氧化氫為17.31μmol/L、羥自由基為9.75μmol/L,活性氧消耗和滅活了抗氧化酶,使S
3、OD、GSH活性降低,造成細胞膜受損,ATP酶活性降低、通透性增加,使細胞內(nèi)酶LDH、GOT、ALP大量溢出。0.5%DMSO對這些影響均具有較好的抑制作用?! ?、DMSO對DU作用于BEAS-2B細胞后,可引起細胞DNA斷裂,造成細胞拖尾率、彗星尾部DNA含量、尾長、尾部面積、尾距增加具有較好的抑制作用?! ?、0.5~2.5mg/mlDU可引起B(yǎng)EAS-2B細胞中的微核細胞、多核細胞增多,微核率可達到75‰、多核率40‰,與空
4、白組相比有統(tǒng)計學(xué)意義。DMSO對貧鈾所誘發(fā)的微核細胞增多有較好的抑制作用,而對貧鈾所誘發(fā)的多核細胞增多無明顯的抑制作用?! ?、DU作用于BEAS-2B細胞后引起hprt基因突變率增加,最高可以達到1.154‰,DMSO保護組能有效地降低hprt基因突變率。與同劑量的貧鈾組相比有統(tǒng)計學(xué)意義 5、染色體分析結(jié)果表明,BEAS-2B細胞染色體眾數(shù)為46條,是近二倍體核型,攜帶有三個標(biāo)志性的染色體M1,M3,M5,在連續(xù)傳代至31代后,
5、細胞染色體仍能保持穩(wěn)定,是用作潛在致癌物致癌性檢測和致癌機理研究的適宜靶細胞。BEAS-2B-DU轉(zhuǎn)化細胞主要以二倍體為主的轉(zhuǎn)化細胞群體,同時伴有不定數(shù)量的多倍體,可出現(xiàn)染色體畸變。14號染色體及X染色體的丟失,可能是細胞與BEAS-2B-DU細胞轉(zhuǎn)化的始動、促進和進展有關(guān)。BEAS-2B-DMSO細胞核型介于BEAS-2B細胞和BEAS-2B-DU轉(zhuǎn)化細胞之間說明DMSO對DU對BEAS-2B的遺傳毒性具有一定的抑制作用。 結(jié)
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