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1、本課題擬解決以下兩個(gè)問(wèn)題:1、不同壓力和時(shí)程的高氣壓暴露對(duì)大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)的具體影響,并分析壓力、氧分壓、時(shí)間等因素的影響;2、初步探討ET-1與NOS在高氣壓暴露時(shí)對(duì)心臟功能的調(diào)節(jié)機(jī)制。 第一部分高氣壓暴露對(duì)大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)的影響 方法1、雄性SD大鼠,體重250~280g,18只隨機(jī)分為對(duì)照組、6ATA空氣組和6ATA常氧高氮組。2、動(dòng)物在艙外行股動(dòng)脈及左心室插管術(shù),然后進(jìn)艙分別進(jìn)行空氣和純氮加壓到6ATA,分別
2、記錄4ATAlmin,6ATAlmin,15min,30min的心臟血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,加壓前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,數(shù)據(jù)處理采用SPSS13.0軟件完成。 結(jié)果1、兩組動(dòng)物在6ATA高氣壓暴露時(shí)與加壓前相比,SBP增加8%~9%,LVSP增加15%,+dp/dtmax增加29%~30%。2、空氣組在6ATA暴露時(shí)與加壓前相比HR下降8%,DBP上升12%,常氧高氮組無(wú)
3、明顯改變。3、在6ATA停留,暴露30min過(guò)程中,兩組動(dòng)物SBP、LVSP、+dp/dtmax、HR、DBP無(wú)明顯改變。 第二部分高氣壓暴露對(duì)大鼠心肌及血漿ET-1、NOS的影響 方法1、雄性SD鼠,體重220g左右,24只隨機(jī)分為對(duì)照組、6ATA空氣組和6ATA常氧高氮組,暴露時(shí)間均為60min。2、人員進(jìn)入艙內(nèi)處死大鼠,在主動(dòng)脈出口處剪切心臟,沿左室長(zhǎng)軸一分為二,分別置于10%多聚甲醛溶液中固定,同時(shí)取血漿和血清標(biāo)
4、本通過(guò)遞物桶傳遞到艙外。3、HE染色觀察各組心肌組織變化,Envision免疫組化法觀察左心室心肌ET-1、iNOS、eNOS表達(dá)情況,放射免疫測(cè)定血漿ET-1含量,硝酸還原酶法測(cè)定血清一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量,比色法測(cè)定血清一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,各組結(jié)果采用單因素方差分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,數(shù)據(jù)處理采用SPSS13.
5、0軟件完成。 結(jié)果1、6ATA的空氣和常氧高氮組暴露60min后左心室心肌ET-1的表達(dá)明顯增強(qiáng),空氣組eNOS表達(dá)下降,iNOS表達(dá)無(wú)明顯變化。常氧高氮組eNOS及iNOS表達(dá)均無(wú)明顯變化。2、6ATA的空氣和常氧高氮組暴露60min后血漿ET-1含量增加(p<0.01),6ATA空氣組血清NO含量、NOS活性下降(p<0.05),常氧高氮組血清NO、NOS無(wú)明顯變化。 結(jié)論1、單次高氣壓暴露可導(dǎo)致心肌收縮力增強(qiáng),心肌
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