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文檔簡介
1、目的:探討能使兔耳緣靜脈硬化治療后靜脈閉塞而不引起耳緣靜脈周圍組織損傷的平陽霉素的濃度。
方法:實驗動物:30只成年新西蘭大白兔。60只兔耳隨機分成6組,每組10只耳。分別為A組、B組、C組、D組、E組和F組。A組(n=10):耳緣靜脈注射生理鹽水0.3ml;B組(n=10):耳緣靜脈注射1mg/ml平陽霉素0.3ml;C組(n=10):耳緣靜脈注射2mg/ml平陽霉素0.3ml;D組(n=10):耳緣靜脈注射3mg/ml平陽
2、霉素0.3ml;E組(n=10):耳緣靜脈注射4mg/ml平陽霉素0.3ml;F組(n=10):耳緣靜脈注射6mg/ml平陽霉素0.3ml。在注射后第2天、7天、14天、21天觀察耳緣靜脈的肉眼下的變化和光鏡、透射電鏡下的形態(tài)學變化;用免疫組織化學的方法定性檢測caspase-3的變化。選取第七天的標本,每張切片取3個高倍鏡視野,計算出管壁及其周圍組織 caspase-3陽性率的平均值,用(x?s)%表示,應用SAS8.0統(tǒng)計軟件進行單
3、因素的方差分析和配對t檢驗。
結(jié)果:不同濃度的PYM作用兔耳緣靜脈后,肉眼下觀察:第2天見耳緣靜脈及其周圍紅腫。第7天時見紅腫現(xiàn)象明顯減輕。A組、B組和C組未見管腔的閉塞。D組、E組和F組在第14天時出現(xiàn)了耳緣靜脈的閉塞;在第21天時可見硬化區(qū)有毛細血管長入。6mg/ml的PYM還引起耳緣靜脈周圍皮膚組織的破潰。光鏡下觀察:不同濃度的PYM均引起血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞的增生,在第2、7天時血管壁及血管周圍組織均有炎性細胞的浸
4、潤, D組、E組和F組在第14天時可見由于增生的細胞使管腔閉塞。第21天可見毛細血管長入硬化區(qū)。透射電鏡下觀察:取第7天的標本進行觀察,發(fā)現(xiàn)實驗組血管內(nèi)皮細胞的細胞核有染色質(zhì)邊集現(xiàn)象,線粒體腫脹并且有空泡出現(xiàn)。血管的平滑肌細胞的細胞核也有染色質(zhì)的邊集,在細胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)了凋亡小體。Caspase-3陽性表達率:caspase-3在所有的標本中均可見陽性表達,在同一組中,caspase-3的表達率在第7天的表達率最高。對照組表達率極低,B組、
5、C組與對照組caspase-3表達率比較,它們與對照組沒有明顯的差異,p>0.05。D組、E組、F組的caspase-3的表達率與對照組比較,p均小于0.05,有明顯的差異。各組間的caspase-3表達率的比較,可見A組、B組、C組之間沒有明顯的差異,D組、E組、F組之間也沒有明顯的差異,但是D組、E組、F組和A組、B組、C組之間比較有明顯的差異。Caspase-3的表達率在血管壁和血管周圍組織比較:可見 D、E組中有明顯的差異血管壁
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