大鼠類風濕性關(guān)節(jié)炎實驗模型的建立與評價.pdf

1、類風濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎、破壞性關(guān)節(jié)病變?yōu)橹饕卣鞯穆?、進行性、侵襲性自身免疫性疾病，致畸、致殘率極高且大多數(shù)患者有反復發(fā)作的病程，雖然與RA發(fā)病相關(guān)的因素己經(jīng)清楚，其中，多種免疫活性細胞的活化，細胞因子、炎癥介質(zhì)的共同參與，血管翳的形成等是造成該病發(fā)生、發(fā)展的重要原因。但是RA的具體發(fā)病機理至今不明，尚待進一步研究。目前，改善臨床癥狀的抗風濕藥是治療RA的主要手段，由于傳統(tǒng)抗

2、風濕藥的毒副作用較大，而生物制劑價格昂貴，因而患者長期服用依從性差，不利于疾病控制。因此研制開發(fā)有效、毒副作用小的抗風濕藥物勢在必行。而研究并建立合理有效的類風濕性關(guān)節(jié)炎動物模型是研制開發(fā)有效治療藥物和制訂有效治療措施的關(guān)鍵。
　　 本研究以Wistar大鼠為試驗動物，用不同的實驗試劑對大鼠進行免疫，從關(guān)節(jié)炎指數(shù)評定、血清學檢測、病理學檢測和影像學檢測等方面對模型進行綜合評價。方法是：將4～6周齡雌性Wistar大鼠隨機分成五組

3、：M1組（CFA足跖部皮下注射法免疫）、M2組（雞CII+CFA乳化劑足跖部、尾根部、背部三點注射法免疫）、M3組（雞CII+CFA乳化劑+冰浴7d）、M4組（雞CII蛋白免疫）、對照組（不做任何處理），7d后足跖部皮下注射加強免疫一次。于大鼠首次免疫后7d、14d、21d分別測量各組大鼠的足跖部厚度，并進行關(guān)節(jié)炎指數(shù)（AI）評定；于21d、42d采用雙抗體夾心ELISA法測定各組大鼠血清中抗CII抗體水平、細胞因子TNF-α、IL-1

4、β和IL-17水平，并于21d和42d分別觀察大鼠的放射學變化和組織病理學變化。通過以上幾方面指標的檢測綜合評價建立的大鼠實驗性關(guān)節(jié)炎模型。
　　 研究結(jié)果表明：M1～M3組大鼠在首次免疫10d后不同的測定時間點AI值和足跖部厚度均顯著高于對照組和M4組大鼠（P<0.05），炎癥高峰期出現(xiàn)于首次免疫后的19～27d，而M4組與對照組的大鼠比較不具有統(tǒng)計學意義。M2、M3組大鼠血清中抗CII抗體水平在炎癥高峰期時極顯著的高于對照組

5、（P<0.01），而M1組和M4組大鼠血清中抗CII抗體水平則無明顯變化。M1～M3組大鼠在炎癥高峰期時血清中TNF-α、IL-1β、IL-17水平均顯著高于對照組大鼠（P<0.05），但高峰期后炎癥水平逐漸有所下降，但42d仍高于正常水平。病理組織切片顯示，M1～M3組大鼠在關(guān)節(jié)滑膜中有大量炎性細胞浸潤，骨細胞增生，并形成血管翳。X光片顯示踝關(guān)節(jié)周圍軟組織嚴重腫脹，踝關(guān)節(jié)、足趾關(guān)節(jié)間隙模糊、狹窄，骨質(zhì)破壞。
　　 通過以上指標