重組人生長(zhǎng)激素干預(yù)人結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)及GHR-JAK2-STAT3通路機(jī)制.pdf

1、目的：探討重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)對(duì)不同生長(zhǎng)激素受體(GHR)表達(dá)狀態(tài)的人結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及其JAK2-STAT3信號(hào)通路影響。
　　方法：采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人結(jié)腸癌細(xì)胞株的GHR表達(dá)狀態(tài)，選擇GHR較高表達(dá)和較低表達(dá)的細(xì)胞株各一株進(jìn)入實(shí)驗(yàn)，多種劑量rhGH干預(yù)各分組，采用MTT法分析人結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)變化，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖指數(shù)(PI)、細(xì)胞周期分析及凋亡變化，采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)JAK2-STAT3信號(hào)通路相關(guān)分子J

2、AK2、pJAK2、STAT3、pSTAT3、VEGF、Bcl-xL、CyclinD1蛋白水平的變化，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)JAK2-STAT3信號(hào)通路相關(guān)分子GHR、JAK2、STAT3、VEGF、Bcl-xL、Cyclin D1核酸水平變化。
　　結(jié)果：HCT-8細(xì)胞株GHR表達(dá)率為59.6％，為較高表達(dá)GHR組，LOVO細(xì)胞株GHR表達(dá)率為3.5%，為較低表達(dá)GHR組。rhGH處理HCT-8細(xì)胞后，顯著促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)

3、(P=0.0068<0.01)，G2/M期比例明顯高于未處理組(P=0.0047<0.01)，PI升高，凋亡率減低(P=0.0033<0.01)，并上調(diào)pJAK2、pSTAT3、VEGF、CyclinD1、Bcl-xL蛋白表達(dá)(P=0.0422<0.05)，上調(diào)靶基因GHR、JAK2、STAT3、VEGF的mRNA表達(dá)(P=0.0387<0.05)，但CyclinD1和Bcl-xL的mRNA表達(dá)無(wú)明顯變化(P=0.0732>0.05)；