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文檔簡介
1、前言:
鋅是體內(nèi)含量第二位的過渡金屬元素,也是體內(nèi)重要的微量元素之一,在機(jī)體有廣泛而重要的生理功能:影響細(xì)胞增殖、分化,維持正常的細(xì)胞周期;參與體內(nèi)各種新陳代謝過程,起著催化、活性調(diào)節(jié)及穩(wěn)定結(jié)構(gòu)等作用,在生長發(fā)育中起重要作用。鋅缺乏(zincdeficiency)是指機(jī)體鋅含量減少所造成的鋅生物學(xué)功能降低,并引發(fā)一系列相關(guān)癥狀,諸如生長發(fā)育遲緩、身材矮小、智力低下等。雖然鋅對機(jī)體健康的重要性已經(jīng)得到充分的認(rèn)識,但世界上仍然
2、約有50%的人口鋅攝取不足;我國是一個農(nóng)業(yè)大國,尤其在農(nóng)村,植物性食物在家庭膳食結(jié)構(gòu)中占較大比例,加上影響鋅吸收的因素較多,因此容易造成機(jī)體缺鋅。同時,鋅制劑及鋅強(qiáng)化食品廣泛應(yīng)用,因此人群中缺鋅較為普遍,并存在補(bǔ)鋅不當(dāng)?shù)痊F(xiàn)象。1992年,第三次全國營養(yǎng)普查顯示,我國有60%以上的兒童存在著不同程度的鋅缺乏。有關(guān)缺鋅影響身體發(fā)育的研究層出不窮,但對于缺鋅與牙齒發(fā)育的研究目前較少,僅有一部分文獻(xiàn)報道鋅缺乏與兒童患齲率存在關(guān)聯(lián)這一現(xiàn)象。并未闡
3、述缺鋅會使牙體發(fā)生哪些改變,而這些改變又會帶來什么后果。本課題通過建立缺鋅小鼠模型,觀察缺鋅小鼠牙硬組織結(jié)構(gòu)與成釉細(xì)胞中凋亡酶caspase-9的表達(dá)情況,從細(xì)胞水平觀察缺鋅對成釉細(xì)胞的作用機(jī)制,為探討缺鋅導(dǎo)致的牙發(fā)育異常提供新的思路和理論依據(jù)。
材料與方法:
一、實(shí)驗(yàn)動物及分組
成年健康CD-1待產(chǎn)雌性小鼠12只。由中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物部提供。分籠飼養(yǎng),常規(guī)飲食。產(chǎn)后母鼠與仔鼠同籠并隨機(jī)分為兩
4、組。A:對照組:給與正常鼠糧(鋅含量:30mg/kg)和去離子水。B:鋅缺乏實(shí)驗(yàn)組:母鼠產(chǎn)后立即喂以缺鋅飼料(鋅含量:0.85mg/kg)和去離子水。兩組小鼠均在喂養(yǎng)5周后進(jìn)行取材。
二、檢測指標(biāo)
采用HE染色和免疫組化技術(shù),觀察純系CD-1小鼠缺鋅后,牙體組織的形態(tài)學(xué)改變以及成釉細(xì)胞中凋亡酶caspase-9的表達(dá)情況。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
一、鋅缺乏小鼠大體觀察結(jié)果:
缺
5、鋅組小鼠體型明顯較對照組小,且缺鋅組小鼠毛發(fā)枯黃、缺乏光澤,牙體呈淡黃色,磨耗較對照組嚴(yán)重。其中,缺鋅組小鼠體重為17.08±0.95g;對照組小鼠體重為32.82±0.70g。提示缺鋅小鼠體重明顯輕于正常小鼠(P<0.01)
二、HE染色結(jié)果
實(shí)驗(yàn)組小鼠髓腔內(nèi)前期牙本質(zhì)寬于正常組,成牙本質(zhì)細(xì)胞排列紊亂,無極性。髓腔中出現(xiàn)較多的空泡,細(xì)胞數(shù)量明顯減少。
三、免疫組織化學(xué)染色
應(yīng)用免
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