兒童急性白血病Notch1、Jagged1基因和蛋白表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：
　　通過應(yīng)用RT-PCR與免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）技術(shù)檢測(cè)急性白血病(AL)兒童骨髓(MB)或外周血(BP)細(xì)胞中Notch相關(guān)分子mRNA及Notch1蛋白的表達(dá)情況，探討Notch信號(hào)通路在兒童各型急性白血病發(fā)生中的致病機(jī)制，為兒童AL的靶向治療提供新的理論依據(jù)。
　　方法：
　　第一部分：通過應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)AL兒童MB或BP單個(gè)核細(xì)胞中Notch信號(hào)的Notch1受體與Jagged1配體以及內(nèi)參照

2、β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)的mRNA的表達(dá)。47例初診急性白血病兒童（其中B-ALL26例，T-ALL6例和AML15例）和同期非惡性血液病BM標(biāo)本5例；門診體檢正常兒童PB標(biāo)本15例，評(píng)價(jià)Notch1和Jagged1基因陽性表達(dá)率；通過Notch1基因=Notch1基因表達(dá)/β-actin表達(dá)和Jagged1基因=Jagged1基因表達(dá)/β-actin表達(dá)，計(jì)算檢測(cè)基因的表達(dá)水平。
　　第二部分：通過應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC

3、）技術(shù)檢測(cè)急性白血病兒童骨髓涂片細(xì)胞中Notch1蛋白表達(dá)。42例初診急性白血病兒童（其中B-ALL25例，T-ALL7例和AML10例）骨髓涂片和同期非惡性血液病BM涂片標(biāo)本22例作為對(duì)照，每例高倍鏡視野下隨機(jī)計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，從Notch1蛋白陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞著色程度進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：
　　第一部分：Notch1基因的陽性率：ALL及AML組顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；ALL組與AML組比較

4、（P>0.05），其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Notch1基因的表達(dá)水平：ALL組及AML組和對(duì)照組比較，ALL組與AML初發(fā)組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　T-ALL組與B-ALLNotch1基因陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；但是，兩組Notch1基因表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.835，P=0.001）。
　　Jagged1基因的陽性率：ALL組與對(duì)照組比較（P>0.05）、AML組與對(duì)照組比較及A

5、LL組與AML組比較（P>0.05）差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Jagged1基因的表達(dá)水平：ALL組及AML組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ALL組與AML組比較，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。T-ALL組與B-ALL在基因表達(dá)陽性率及基因表達(dá)水平兩方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　發(fā)病初期同時(shí)收集BM及PB的12例AL患兒，進(jìn)行BM和PB中基因表達(dá)水平的半定量比較，發(fā)現(xiàn)Notch1基因、Jagged1

6、基因在BM及PB中表達(dá)一致，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　第二部分：Notch1受體蛋白的陽性細(xì)胞表達(dá)率：T-ALL組及AML組與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），B-ALL與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），ALL組與對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。T-ALL患兒和B-ALL患兒進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　Notch1蛋白的陽性細(xì)胞表達(dá)率依照

7、ALL-LR、ALL-MR、ALL-HR的次序升高，HR組高于LR組及MR組，但組間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.在不同類型兒童ALL中，Notch1的表達(dá)有明顯差異，T-ALL患兒中的Notch1表達(dá)明顯高于B-ALL。
　　2.Notch1在兒童AML異常表達(dá)，提示Notch1可能在兒童AML中起著重要作用。
　　3.Jagged1在ALL及AML患兒中異常表達(dá)，Jagged