羅格列酮通過激活PPARγ改善肺動脈高壓大鼠肺血管病變的研究.pdf

1、前言：
　　肺動脈高壓（PAH）是以肺血管阻力進(jìn)行性增加為特征的嚴(yán)重疾病，肺動脈高壓是肺高壓(PH)的最常見類型之一。血管重構(gòu)是PAH發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)，目前的治療藥物雖然可以改善肺動脈高壓患者的臨床癥狀，但是不能抑制和逆轉(zhuǎn)肺血管重構(gòu)。肺動脈高壓的發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜，至今未完全闡明。
　　近年研究發(fā)現(xiàn)，PAH的發(fā)病與PPARγ的表達(dá)降低相關(guān)，PPARγ激動劑能夠改善PAH的發(fā)展。羅格列酮屬于噻唑烷二酮類藥物(TZDs)，是PP

2、AR的人工合成配體，具有抗炎、抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡分化的作用。
　　本研究期望通過野百合堿誘導(dǎo)的大鼠PAH模型，觀察羅格列酮對肺血管病變的保護(hù)作用。
　　目的：
　　探討過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)及其配體對野百合堿誘導(dǎo)的肺動脈高壓大鼠肺血管病變的作用及機(jī)制。
　　方法：
　　1、動物分組:將40只SD大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只:正常對照組、羅格列酮對照組、野百合堿組、和羅格列酮干預(yù)組。野百合

3、堿組和羅格列酮干預(yù)組給予野百合堿60mg/kg皮下注射;2個對照組給予等體積生理鹽水皮下注射。羅格列酮對照組和羅格列酮干預(yù)組自注射生理鹽水或野百合堿后，給予羅格列酮生理鹽水混懸液(4.0 mg/kg/d)灌胃，正常對照組和野百合堿組每日給予等體積生理鹽水灌胃，共4周。
　　2、以右心導(dǎo)管測定右室收縮壓(RVSP)和肺動脈平均壓(mPAP);分離心臟，沿室間隔分離右心室，稱量右心室、左心室+室間隔，計算右心肥厚指數(shù)(RVHI)作為評

4、價右心室肥厚的指標(biāo)。
　　3、ELISA法測定血漿NO和內(nèi)皮素(ET-1)水平。
　　4、采用HE及ElastinVan Gieson染色法觀察各級肺動脈的病理改變，測定并計算中膜厚度百分比(WT％)評價血管重構(gòu)程度。
　　5、免疫組織化學(xué)法觀察PPARγ的表達(dá)情況。
　　6、采用非配對t檢驗及單因素方差分析比較組間差異，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、羅格列酮干預(yù)對血流動力學(xué)

5、和右心室肥厚的影響
　　羅格列酮干預(yù)組mPAP(28.2±5.3)mmHg、RVSP(46.6±9.1) mmHg和RVHI(0.35±0.05)較野百合堿組明顯改善(P＜0.05或P＜0.01)，但仍高于正常對照組和羅格列酮對照組(P＜0.01)。羅格列酮對照組mPAP、RVSP及RVHI較正常對照組有進(jìn)一步升高趨勢，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　2、與野百合堿組比較，羅格列酮干預(yù)組可升高血漿NO水平、降低E

6、T-1水平(P＜0.05)。
　　3、羅格列酮對肺小動脈病理學(xué)形態(tài)的影響
　　正常對照組和羅格列酮對照組大鼠肺組織切片HE染色可見管壁及周圍結(jié)構(gòu)清楚;野百合堿組肺組織切片可見管壁增厚，中膜平滑肌增生、紊亂，而羅格列酮干預(yù)組管壁增厚較輕。正常對照組和羅格列酮對照組大鼠肺組織切片ET+VG染色可見彈力纖維清晰;野百合堿組肺組織切片可見內(nèi)外兩層彈力纖維板呈“波浪狀”，中膜增生、肥厚，而羅格列酮干預(yù)組兩層彈力纖維板間中膜則呈輕度增厚

7、。
　　4、羅格列酮對肺組織PPARγ表達(dá)的影響
　　免疫組化染色下，PPARγ陽性細(xì)胞主要分布在肺血管內(nèi)膜，表現(xiàn)為胞漿及胞核染成棕黃色。對照組大鼠肺動脈內(nèi)膜未見明顯PPARγ表達(dá);羅格列酮對照組肺動脈內(nèi)膜可見小動脈內(nèi)膜PPARγ表達(dá);野百合堿組小動脈內(nèi)膜PPARγ表達(dá)減少;羅格列酮干預(yù)組PPARγ表達(dá)增高。
　　結(jié)論：
　　羅格列酮可通過激活PPARγ改善野百合堿誘導(dǎo)的肺動脈高壓大鼠肺血管重構(gòu)，并延緩肺動脈高壓