一枝蒿黃酮類(lèi)成分抗病毒作用的譜效關(guān)系研究.pdf

1、目的:建立中藥一枝蒿不同溶劑提取物HPLC指紋圖譜，根據(jù)HPLC圖譜與一枝蒿抗病毒活性測(cè)定結(jié)果，“譜-效”結(jié)合，直觀分析其起抗病毒活性作用的化學(xué)成分，揭示一枝蒿抗病毒作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　①考察一枝蒿黃酮類(lèi)成分提取方法及HPLC色譜條件，應(yīng)用中藥指紋圖譜技術(shù)建立一枝蒿不同溶劑提取物的HPLC指紋圖譜，采用相似度作為指紋圖譜的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)定特征峰，確定相似度評(píng)價(jià)結(jié)果;
　　②以MDCK細(xì)胞培養(yǎng)模型，采用細(xì)胞病

2、變法(CPE)，結(jié)合MTT法作為指標(biāo)，初步評(píng)價(jià)一枝蒿抗流感病毒活性;以轉(zhuǎn)染人HBV-DNA肝細(xì)胞HepG2.215細(xì)胞培養(yǎng)模型，初步評(píng)價(jià)一枝蒿抗乙肝病毒活性;
　　③運(yùn)用灰色分析建模軟件，將HPLC指紋圖譜數(shù)據(jù)與抗病毒結(jié)果進(jìn)行關(guān)聯(lián)，獲得一枝蒿不同提取部位色譜指紋特征與其抗病毒作用之間的關(guān)聯(lián)系數(shù)，從而確定各成分對(duì)“抗流感、抗乙肝病毒作用”貢獻(xiàn)的大小順序;
　?、茏詈?，采用HPLC-MS法，初步了解一枝蒿抗病毒活性作用可能的化學(xué)

3、物質(zhì)。
　　結(jié)果:
　?、贅?gòu)建一枝蒿20個(gè)提取物的HPLC指紋圖譜，通過(guò)“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”(2004年A版)軟件，確定了9個(gè)共有色譜峰;
　?、谕ㄟ^(guò)體外抗病毒試驗(yàn)，在一枝蒿不同提取部位樣品中，S2、S5、S6號(hào)呈現(xiàn)一定的抗流感病毒作用;S2、S3、S4、S5、 S7、 S8、S11、S12、S13、S14、S16號(hào)呈現(xiàn)一定的抗乙肝病毒作用;
　?、弁ㄟ^(guò)灰色關(guān)聯(lián)度分析方法，確定各特征峰所代表的各化學(xué)

4、成分（以特征峰編號(hào)作為該特征峰所代表的化學(xué)成分名稱(chēng)）對(duì)其抗流感病毒作用貢獻(xiàn)的大小順序?yàn)?9＞4＞3＞1＞7＞2＞6＞5＞8;抗乙肝病毒作用貢獻(xiàn)大小順序?yàn)?9＞7＞5＞3＞4＞2＞8＞1＞6;
　　④通過(guò)HPLC-MS分析，抗流感病毒作用的活性成分可能主要為紫花牡荊素、一枝蒿酮酸、芹菜素化合物等;抗乙肝病毒作用的活性成分可能主要為紫花牡荊素、刺槐素化合物等。
　　結(jié)論:所構(gòu)建的一枝蒿不同溶劑提取物HPLC指紋圖譜方法簡(jiǎn)單，重復(fù)