頜下腺組織工程生物衍生支架材料的制備及生物學性質的實驗研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學博士學位論文頜下腺組織工程生物衍生支架材料的制備及生物學性質的實驗研究姓名：鄧春富申請學位級別：博士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學指導教師：王玉新20040301織結構特點，并測量其孔徑大小，同時計算其孑L隙率。4制備頜下腺脫細胞基質支架材料的浸提液，通過急性全身毒性試驗，分析脫細胞后的生物衍生支架材料對機體的毒性作用。5通過體內埋植試驗觀察頜下腺脫細胞基質支架材料對組織的影響，判斷該支架材料的組織相容性。6MTT比色法檢測頜下腺細胞與

2、支架材料體外復合培養(yǎng)第7天時的吸光度值(OD值)，測定波長為490nm，檢測細胞的存活率，通過計算細胞的相對增殖百分率，判斷該支架材料的細胞相容性。7應用胰酶消化法進行頜下腺細胞的分離、純化，然后進行頜下腺細胞的原代和傳代培養(yǎng)，倒置相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)細胞的形態(tài)結構。8將傳代培養(yǎng)的第2代細胞與頜下腺脫細胞基質支架材料體外復合培養(yǎng)，第3、5、7天時，通過掃描電鏡觀察頜下腺細胞在支架材料上的生長情況，細胞的表面形態(tài)及結構特點。實驗結果一、頜

3、下腺脫細胞基質(SubmandibularGlandAcellularMamx，SGAM)支架材料的成分分析1組織形態(tài)學觀察：l％TritonX一100脫細胞后，光鏡下見細胞輪廓存在，細胞外觀形態(tài)無明顯變化。但細胞核有的固縮，有的碎裂，不規(guī)則，細胞核排列無序，呈現擁擠狀態(tài)；而3％TntonX—100脫細胞后的支架材料，頜下腺細胞成分完全消失，光鏡下見不到細胞核形態(tài)，粉紅色的膠原纖維排列較疏松，可見細胞脫除后遺留的陷窩，呈篩網狀結構。2透

4、射電鏡觀察：l％TritonX一100脫細胞后，透射電鏡下見細胞膜破損，細胞器破壞、破碎，染色質凝集，形成多個散在的碎塊，有的細胞核濃縮，并可見到半月狀的凋亡小體。3％TritonX一100脫細胞后，細胞器及細胞核消失，只見殘留的細胞輪廓，周邊可見不同方向走行的膠原纖維斷面。3掃描電鏡觀察：1％TritonX一100脫細胞后，細胞輪廓無明顯改變，但其表面細胞膜被破壞，表面不光滑，呈蜂窩狀改變。3％TritonX一100脫細胞后，見細胞完