P15基因、上皮鈣粘蛋白（E-cadherin）和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP10）在食管癌中的研究.pdf

1、第一部分 目的：1．探討多種腫瘤抑制基因(P15基因)在食管鱗狀細胞癌(esophagealsauamous cell carcinoma)及癌旁正常組織中的表達情況，研究P15基因在食管鱗狀細胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。2．研究P15基因與食管癌發(fā)生的相關(guān)因素——吸煙或／和飲酒的關(guān)系。3．P15基因與臨床病理參數(shù)如臨床分期、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤外浸的相關(guān)性，研究P15基因與食管癌惡性生物學(xué)行為及預(yù)后的關(guān)系。 方法

2、：取46例食管癌及癌旁正常組織標(biāo)本，應(yīng)用經(jīng)典的酚、氯仿法提取高分子量的基因組DNA，并對P15基因的外顯子1和外顯子2進行PCR擴增，以1.5％瓊脂糖凝膠電泳及溴化乙錠染色，分析PCR產(chǎn)物中P15基因的純合性缺失。 結(jié)果：食管癌旁正常粘膜中未見P15基因純合性缺失。食管癌組織中，P15基因的純合性缺失率為63.04％(29／46)，其中外顯因子1缺失者15例，外顯因子2缺失者9例，兩個外顯因子均缺失者5例，占總?cè)笔Э倲?shù)的17.2

3、4％。P15基因缺失率在食管鱗狀細胞癌與癌旁正常組織中的差異呈顯著性(P<0.01)。P15基因純合性缺失在吸煙組、飲酒組、既吸煙也飲酒組分別為64.71％、64.52％、59.26％，而在不吸煙組、不飲酒組、既不吸煙也不飲酒組則分別為58.33％、60.00％、55.56％，統(tǒng)計學(xué)上無顯著差異(P>0.05)。P15基因純合性缺失率在食管癌臨床分期Ⅰ-Ⅱ期及Ⅲ-Ⅳ期中分別為57.14％和 68.0％，統(tǒng)計學(xué)上無顯著性差異(P>0.05

4、)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組分別為53.33％和67.74％，無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，腫瘤外浸組和無外浸組分別為60.0％和65.38％，無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。P15基因缺失率與食管鱗狀細胞癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤外浸均無明顯相關(guān)性，統(tǒng)計學(xué)無顯著性差異(P>0.05)，而與食管癌組織學(xué)分級關(guān)系密切，差異呈顯著性(P<0.05)。P15基因純合性缺失率在食管癌DNA異倍體組和二倍體組分別為76.47％(26／34)

5、和25.0％(3／12)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論： 1．食管鱗狀細胞癌存在P15基因高頻率的純合性缺失，表明P15基因的純合性缺失參與了食管鱗狀細胞癌形成的分子機制，并在其發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。 2．吸煙或／和飲酒與P15基因純合性缺失關(guān)系不明顯(P>0.05)，可以說，吸煙與飲酒在導(dǎo)致食管癌發(fā)生上，并不是由于通過使P15基因純合性缺失而起作用的。 3．P15基因純合性缺失與食管癌

6、組織學(xué)分級關(guān)系密切，同時與食管癌的DNA倍體水平密切相關(guān)。P15基因水平的檢測，可了解食管癌的惡性生物學(xué)行為，有助于判斷其預(yù)后。 第二部分 目的：探討食管癌組織中上皮鈣粘蛋白(E-cadherin)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP10)的表達情況，研究二種指標(biāo)與食管癌的臨床分期、組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤外侵及性別、年齡的關(guān)系。 方法：免疫組化法研究46例食管癌及癌旁正常組織中E-cadherin和MMP10的表達情

7、況，并與食管癌的生物學(xué)行為進行比較。 結(jié)果：與癌旁正常粘膜組織相比，食管癌組織中E-cadherin的表達明顯減弱(p<0.01)；食管癌旁正常粘膜中未見MMP10表達，食管癌組織中MMP10陽性表達率為34.78％(16／46)，明顯高于癌旁正常食管粘膜組織(p<0.05)。E-cadherin的表達強度與食管癌的組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期和腫瘤外侵密切相關(guān)(p<0.05)。MMP10的表達強度與食管癌組織分級呈正相關(guān)(r

8、=0.29774，p<0.05)，與臨床分期呈正相關(guān)(r=0.39010，p<0.01)，同時與食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤外侵密切相關(guān)，統(tǒng)計學(xué)差異顯著(p<0.05)。 結(jié)論： 1．食管癌組織中El-cadherin的表達明顯減弱，且與食管癌組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及腫瘤外侵關(guān)系密切，表明E-cadherin與食管癌的轉(zhuǎn)移、浸潤、生長和粘附有關(guān)，可做為一個重要的腫瘤標(biāo)記物。 2．MMPlO在食管癌的表達強度與