雌激素對急性哮喘大鼠的作用.pdf

1、目的：研究雌激素(E)對急性哮喘大鼠模型干預后的呼吸力學改變，肺組織中雌激素受體B(ER β)表達以及嘈酸粒細胞計數(shù)的變化，探討雌激素對急性哮喘的作用。 方法：雄性SD大鼠24只，6～8周齡，體重160～235 g。隨機分為哮喘模型組(Asthma grouD，A)、雌激素干預組(Estrogen group，E)、正常對照組(Control group，N)三組，每組8只。A組、E組分別于第1、8d腹腔注射10％卵白蛋白懸液1

2、ml致敏，第15天開始以1％卵蛋白超聲霧化激發(fā)，30min·d<'-1>，共7d，建立哮喘模型。N組操作同前，但以生理鹽水代替卵蛋白。從第15d開始，A組每次激發(fā)前1h腹腔注射生理鹽水lml，共7 d：E組每次激發(fā)前1h予腹腔注射17-β雌二醇30ug·kg<'-1>(1ml)，共7 d：N組每次生理鹽水霧化之前1h予以生理鹽水1ml腹腔注射。從第14d始，每日觀察各組動物體重變化以及激發(fā)后呼吸、行為活動等反應，并于第22d麻醉后行氣管

3、、食管插管，測定激發(fā)后的氣道流速及壓力曲線，計算潮氣量(Vt)，呼吸頻率(F)，肺動態(tài)順應性(C<,dyn>)和肺阻力(R<,L>)；所有實驗大鼠均在肺功能檢測后心臟采血2mL，以放射免疫方法檢測血清雌二醇濃度，同時收集支氣管肺泡灌洗(BALF)，計數(shù)嗜酸粒細胞；取各大鼠右中肺經(jīng)10％中性福爾馬林溶液固定后，石蠟包埋，取材切片，作HE染色和ER β免疫組化染色。 結(jié)果：1.A組霧化吸入卵蛋白后，出現(xiàn)以前爪搔抓面部，隨后呼吸加快(

4、140.63±8.63次/分)、加深、點頭呼吸等哮喘發(fā)作樣癥狀，且體重增長緩慢甚至不增加(97±25.32g)，而E組呼吸略加快(95.75±8.56次/分)，平均體重增長為(149.25±31.82 g)；N組霧化吸入生理鹽水前后呼吸頻率及深度無明顯變化(90.63±5.63次/分)，體重增長穩(wěn)定(90.63±5.63 g)。A組呼吸頻率加快、體重增長緩慢，和其他兩組相比，均P<0.01，差異顯著；N組與E組之間無明顯差異(P>0.0

5、5)。 2.肺功能結(jié)果：A、E、N組Vt(ml)分別為0.28±0.04、0.78±0.07、0.89±0.18，A組明顯低，與其他兩組分別比較均有顯著差異(P<0.01)；A、E、N組F(次·min-1)分別為143.12±7.28、94.10±1.36、96.11±4.01，A組明顯增快，和另外兩組分別比較均有顯著差異((P<0.01)；A、E、N組RL(cmH<,2>O·ml-1·s-1)分別為3.51±1.03、1.12

6、±0.25、0.32±0.04，A組明顯增高，與其他兩組分別比較均有顯著差異(P<0.01)；Cdyn(ml·cmH<,2>O<'-1>)結(jié)果，A、E、N組分別為0.14±0.04、0.24±0.07、0.35±0.15，A組最低，A組和N組比較有顯著差異(P<0.01)，但和E組比較無差異(P>0.05)。 3.BALF中，A、E、N組白細胞總數(shù)(×10<'8>/L)分別為5.39±0.46、3.30±0.50、2.13±0.

7、27，A組明顯高，與其他兩組分別比較均有顯著差異((P<0.01)：嗜酸粒細胞數(shù)(×10<'8>/L)分別為1.22±0.36、0.42±0.18、0.00，A組最高，與其他兩組分別比較均有顯著差異((P<0.01)：嗜酸粒細胞百分比(％)分別為19.93±4.86、8.63±1.75、0.00，A組最高，與其他兩組分別比較有顯著差異((P<0.01)。 4.HE染色光鏡觀察可見：A組氣道粘膜明顯水腫，粘膜基底層增厚，杯狀細胞增

8、多，支氣管管腔縮小，可見粘液栓，氣道各層及肺泡壁、肺泡腔內(nèi)見有大量炎性細胞浸潤，以嗜酸粒細胞為主，肺泡腔巨噬細胞增多；E組氣道粘膜無明顯水腫，管腔無縮小，氣道粘膜有少量嗜酸粒細胞浸潤，數(shù)量較哮喘模型明顯減少；N組支氣管光滑、上皮完整、氣道粘膜無水腫，肺泡間隔正常，氣道及血管周圍可見少量嗜酸粒細胞。免疫組織化學染色可見E組呼吸道上皮細胞內(nèi)ER β陽性細胞數(shù)明顯多于其他兩組，圖像經(jīng)過灰度掃描顯示，E組ER β表達最多，與其他兩組比較有顯著差

9、異(p<0.01)。 5.E組大鼠血清E2含量最高，和其他兩組相比有顯著差異(p<0.01)。 結(jié)論：(1)OVA致敏及氣道內(nèi)激發(fā)可成功建立急性哮喘大鼠模型。(2)雌激素能夠改善OVA致敏SD大鼠哮喘的癥狀，恢復其體重增長。(3)雌激素能明顯降低OVA致敏SD大鼠急性哮喘模型的氣道阻力。(4)雌激素能明顯減少OVA致敏SD大鼠急性哮喘模型BALF中嗜酸粒細胞及總白細胞數(shù)。(5)病理學結(jié)果表明，雌激素能夠明顯減少OVA致敏