新結構GnRH拮抗類似物LXT-101抗前列腺癌藥理作用及作用機理的研究.pdf

1、前列腺癌是西方男性常見的惡性腫瘤，在美國其發(fā)病率位居男性惡性腫瘤的第一位，死亡率僅次于肺癌位居第二位。我國男性前列腺癌的發(fā)病率和死亡率雖遠低于歐美國家，但近年來呈逐年上升趨勢，隨著我國老齡人口的不斷增加，預計在今后5～10年內，前列腺癌將成為我國中老年男性的常見疾病，對我國男性的健康造成嚴重威脅。因此，前列腺癌的預防、診斷與治療日益成為不容忽視的全球性問題，有關前列腺癌的基礎研究以及治療藥物的研發(fā)已成為當前國際范圍內的熱點之一。

2、 1941年，芝加哥大學的Huggins和Hodges發(fā)現約70％的前列腺癌具有雄激素依賴性，其后前列腺癌的內分泌治療的研究廣泛開展起來。早期的內分泌治療主要是采用手術去勢的方法，該方法雖然療效顯著，但由于手術去勢導致性功能永久性喪失，副作用明顯，且對病人的心理和生理影響很大，因此，內分泌治療藥物的研究和開發(fā)得到了廣泛關注。目前，前列腺癌的內分泌治療藥物主要包括雌激素類、抗雄激素類以及GnRH類似物三種。雌激素類和抗雄激素類是最早用于治

3、療前列腺癌的內分泌藥物，但前者有嚴重的心血管毒性，后者長期應用會引起嚴重的肝毒性和耐藥反應，因而并非理想的內分泌治療藥物。 GnRH類似物是近二十年來發(fā)展起來的一類內分泌治療藥物。其中GnRH激動劑如亮丙瑞林已在臨床上廣泛應用，而GnRH拮抗劑在近十年來剛剛發(fā)展起來。與激動劑相比，GnRH拮抗劑具有療效確切、起效迅速且副作用小的特點，成為近年來內分泌治療藥物的研發(fā)熱點。目前己上市的GnRH拮抗劑僅有Cetrorelix、Gani

4、relix和Abarelix三種，其中Cetrorelix和Ganirelix主要用于青春期性早熟和生殖輔助治療，只有Abarelix的適應癥為進展期前列腺癌。這三種GnRH拮抗劑的開發(fā)上市為廣大的性激素依賴性疾病患者提供了更安全有效的治療手段，但還遠遠不能滿足市場需要。 LXT-101是該所合成的具有自主知識產權的新型GnRH拈抗劑。該室前期研究結果表明，LXT-101單次皮下注射給藥4-8小時，可使大鼠血清睪酮水平降至去勢水

5、平，其效價強度及效能與Cetrorelix相當。進一步研究發(fā)現，LXT-101促組胺釋放的作用強度明顯低于Cetrorelix，提示其致過敏反應的副作用小于Cetrorelix，具有良好的開發(fā)和應用前景。在此基礎上，本研究首先對LXT-101抑制睪酮作用的量效和時效關系及其與垂體GnRH受體(GnRHreceptor，GnRH-R)作用的受體動力學特性進行了研究，進而觀察了LXT-10l對荷人前列腺癌細胞LNCaP裸小鼠腫瘤生長的影響，

6、旨在為將LXT-101開發(fā)成一種新的抗前列腺癌藥物提供藥理學實驗依據，同時為選擇合理的劑型和臨床給藥方案提供參考。在此基礎上，為揭示LXT-101抗前列腺癌的其它藥理學特點及其機理，本研究以雄激素依賴的LNCaP和非雄激素依賴的DUl45兩種人前列腺癌細胞為模型，探討了LXT-101對人前列腺癌細胞增殖的直接作用及其可能的作用機理，并選擇幾種具有代表性的GnRH類似物進行了比較。 一、LXT-101對正常大鼠fill清睪酮水平及

7、性器官重量的影響 二、LXT1013,-I垂體GnRIt受體的競爭結合 三、LXT-101對荷人前列腺癌裸小鼠腫瘤生長及fill清睪酮和PSA的影響 四、LXT101體外應用對人前列腺癌細胞生長的作用及作用機理的研究 本論文主要得出以下結論： l、LXT-101能競爭抑制[125I，D-Trp6]GnRH與垂體GnRH-R的特異性結合，是垂體GnRH-R的高親和力配體，結合LXT-101迅速降低血

8、清睪酮水平的作用特點進行分析，可以判斷LXT-101為垂體GnRH-R的拮抗劑，競爭結合垂體GnRH-R是其迅速降低血清睪酮的主要作用機理。 2、LXT-101單次皮下注射能迅速降低正常大鼠血清睪酮至去勢水平，但作用的維持時間短；增加給藥頻率能明顯降低維持去勢所需的藥物劑量，采用持續(xù)給藥的方式則可使所需藥量進一步降低。表明持續(xù)緩慢釋放的給藥方式能使LXT-101在更小劑量時迅速降低血清睪酮水平，并使之維持在去勢水平。 3

9、、LXT-lOl能抑制荷人前列腺癌細胞LNCaP裸小鼠腫瘤塵長，提示LXT-10l可能對雄激素依賴的前列腺癌有治療作用：同時能明顯降低血清睪酮水平，表明競爭性拮抗垂體GnRH-R從而降低血清睪酮水平是LXT-101抑制雄激素依賴性前列腺癌生長的重要作用機理。 4、在低雄激素環(huán)境下，LXT-101體外應用對雄激素依賴的LNCaP細胞增殖及PSA分泌具有明顯抑制作用，提示LXT-10l對雄激素依賴的前列腺癌細胞的增殖具有直接抑制作用

10、。 5、LXT-101能上調LNCaP細胞表達GnRH-R，抑制其表達EGF和IGF-1的mRNA，并下調ERK磷酸化，下調AR的表達，提示影響GnRH-R、多種細胞因子和AR三條信號轉導通路的交互作用可能是LXT．101抑制LNCaP細胞增殖的作用機理之一。 6、上述研究結果表明LXT-101能通過拮抗垂體GnRH-R從而降低血清睪酮分泌及直接抑制前列腺癌細胞增殖兩種途徑抑制雄激素依賴性前列腺癌的生長，有望開發(fā)成為新型