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1、研究狼瘡腎炎(lupus nephritis,LN)患者尿蛋白刺激人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)NF-κB及其相關(guān)炎性因子TNF-α、IL-6的表達(dá)及與刺激時(shí)間的相關(guān)性。 方法: 收集6例已確診為L(zhǎng)N患者,且臨床尚未開(kāi)始腎上腺皮質(zhì)激素和(或)細(xì)胞毒藥物治療。采集LN患者24小時(shí)尿液,提純尿蛋白。用1mg/ml尿蛋白刺激無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后HK-2細(xì)胞,刺激時(shí)間分別為1h,3h,6h,12h,24h,48h。以無(wú)血清
2、培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后的HK-2細(xì)胞作對(duì)照,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶反應(yīng)(RT-PCR)觀(guān)察不同時(shí)間點(diǎn)尿蛋白對(duì)HK-2細(xì)胞NF-κBmRNA、TNFαmRNA、IL-6mRNA的表達(dá)。 結(jié)果: 1mg/ml尿蛋白均能上調(diào)HK-2細(xì)胞NF-κBmRNA、TNFαmRNA、IL-6mRNA的表達(dá),隨著刺激時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)逐漸增強(qiáng),48h達(dá)高峰。與無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后的HK-2細(xì)胞比較NF-κBmRNA、TNFαmRNA、IL-6mRN
3、A的表達(dá),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)相關(guān)性分析,細(xì)胞NF-κBmRNA、IL-6mRNA、TNFαRNA表達(dá)改變?cè)?8h內(nèi)呈時(shí)間依賴(lài)性,r值分別為0.863,0.892,0.803。P均<0.05。細(xì)胞NF-κBmRNA與IL-6mRNA表達(dá)改變、TNFαRNA表達(dá)改變均呈正相關(guān)(分別為r=0.955,P<0.05和r=0.983,P<0.05)。 結(jié)論: 狼瘡腎炎患者1mg/ml尿蛋白可刺激HK-2細(xì)胞上調(diào)
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