福州市人群大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs表型與基因型的初步研究.pdf

1、目的：在調(diào)查福州市飲食行業(yè)從業(yè)人員腸道大腸埃希菌一般耐藥情況的基礎(chǔ)上，調(diào)查分析福州市人群產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌檢出率、表型與基因型別的流行情況，為制定地區(qū)特異性耐藥菌株的防治策略提供依據(jù)。 方法：2006年3月～2006年6月間，收集并鑒定福州市飲食行業(yè)從業(yè)人員腸道大腸埃希菌，采用瓊脂稀釋法檢測(cè)這些細(xì)菌對(duì)14種抗菌藥物的耐藥性；同期，收集福州市5家醫(yī)院住院病人腸道外感染標(biāo)本的大腸埃希菌。采用臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(Cli

2、nical and Laboratory Standards Institute，CLSI)推薦的終濃度為1μg/ml的頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢曲松及氨曲南對(duì)上述兩種來(lái)源的大腸埃希菌進(jìn)行ESBLs的表型初篩試驗(yàn)，對(duì)于初篩陽(yáng)性者采用微量肉湯稀釋法進(jìn)行確證試驗(yàn)，試驗(yàn)過(guò)程均以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC25922(非產(chǎn)ESBLs菌株)和肺炎克雷伯菌ATCC700603(產(chǎn)ESBLs菌株)作為陰陽(yáng)性對(duì)照。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè)ESB

3、Ls的表型確證試驗(yàn)陽(yáng)性者的相關(guān)編碼基因blaSHV,和blaCTX-M，并用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)分析產(chǎn)CTX-M型ESBLs亞型。 結(jié)果：本研究分離的飲食行業(yè)從業(yè)人員腸道大腸埃希菌共716株，其中對(duì)青霉素類(lèi)耐藥率最高達(dá)65.78％(471/716)；對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗菌藥物耐藥率為21.39％(153/716)；對(duì)一代喹諾酮耐藥率為37.15％(266/716)；而對(duì)三代頭孢和三代喹諾酮類(lèi)藥物耐藥率均較低，分別為17.7

4、4％(127/716)和5.39％(41/716)。這些菌株的多重耐藥(對(duì)三種或三種以上抗生素同時(shí)耐藥)率達(dá)到33.79％(242/716)。本研究還發(fā)現(xiàn)，這些現(xiàn)場(chǎng)分離菌株對(duì)第三代頭孢類(lèi)抗生素與喹諾酮類(lèi)藥物耐藥性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義x2=54.38，p<0.01)，而對(duì)第三代頭孢類(lèi)抗生素與對(duì)氨基糖苷類(lèi)藥物耐藥性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=3.31，p>0.05)。飲食行業(yè)從業(yè)人員腸道分離的大腸埃希菌和臨床感染標(biāo)本分離的大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs檢出

5、率分別為2.51％(18/716)和37.68％(102/264)，從這兩部分人群共檢出120株產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌，這些產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的基因型別為：12.50％(15/120)攜帶SHV型基因、87.5％(105/120)攜帶CTX-M基因、并有10.80％(13/120)同時(shí)攜帶CTX-M基因和SHV型基因。105株CTX-M型中有20.00％(21/105)為CTX-M-1亞群、2.86％(3/105)為CTX-M-2亞

6、群、77.14％(81/105)為CTX-M-9亞群(CTX-M-14)，未發(fā)現(xiàn)CTX-M-9亞群(CTX-M-13)。此120株產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌皆為多重耐藥菌，對(duì)青霉素的耐藥率已達(dá)100％(120/120)；對(duì)一、二代頭孢耐藥率達(dá)70％以上，對(duì)三代頭孢耐藥率皆在60％以上，且以頭孢噻肟最高達(dá)95.33％(115/120)；對(duì)氨基糖苷慶大霉素和卡那霉素耐藥率為70.83％(85/120)和69.16％(83/120)；對(duì)喹諾酮類(lèi)藥

7、物除對(duì)萘啶酸耐藥率高達(dá)84.17％(101/120)外，其他耐藥率皆在60％左右。 結(jié)論：(1)福州市飲食行業(yè)從業(yè)人員腸道大腸埃希菌對(duì)14種抗菌藥物，耐藥率較高的是青霉素，較敏感的是三代頭孢和三代喹諾酮類(lèi)。(2)福州市飲食行業(yè)從業(yè)人員腸道大腸埃希菌對(duì)第三代頭孢菌素與對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物耐藥差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而對(duì)第三代頭孢菌素與對(duì)氨基糖苷類(lèi)耐藥性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)福州市臨床感染標(biāo)本產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌檢出率與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)檢出率大

8、致相同，但遠(yuǎn)高于飲食行業(yè)從業(yè)人員腸道產(chǎn)ESBLs大腸埃希檢出率。(4)福州市產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌基因型別以產(chǎn)CTX-M為主，部分菌株產(chǎn)SHV型，或者同時(shí)產(chǎn)CTX-M和SHV型兩種基因，與國(guó)內(nèi)其他研究相似，但不同于歐美國(guó)家。它們的出現(xiàn)可能?chē)?yán)重威脅本地抗感染治療，應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)測(cè)和控制此產(chǎn)酶的流行和播散。(5)本研究采用PCR-RFP的方法分析CTX-M的亞型，福州市CTX-M型ESBLs以CTX-M-9亞群(CTX-M-14)為主，此外尚有C