槲皮素逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞株K562-ADM和HL-60-ADM多藥耐藥的研究.pdf

1、多年以來人們一直試圖尋找理想的耐藥逆轉(zhuǎn)劑(也稱為化療增敏劑).象維拉帕米、環(huán)孢菌素A等經(jīng)典的多藥耐藥調(diào)節(jié)劑往往在達(dá)到有效逆轉(zhuǎn)濃度之前就產(chǎn)主了嚴(yán)重的難以耐受的毒副反應(yīng)而限制了在臨床的實(shí)際應(yīng)用.近來,一些學(xué)者對(duì)抑制腫瘤的傳統(tǒng)中藥及其有效成分發(fā)生了濃厚的興趣,因?yàn)樗鼈兙哂械投拘缘奶攸c(diǎn),其中槲皮素是一種天然黃酮類化合物,廣泛分布于蔬菜和水果中并具有抗氧化、抗凝、擴(kuò)血管等多種生物活性.最近有人發(fā)現(xiàn)它能抑制白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)、促進(jìn)細(xì)胞凋亡,尤其是能夠

2、逆轉(zhuǎn)多藥耐藥現(xiàn)象而逐漸受到重視.在該研究中我們?cè)噲D闡明槲皮素逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的機(jī)制,分為三個(gè)部分:(一)運(yùn)用MTT法檢測(cè)柔紅霉素對(duì)白血病細(xì)胞株的敏感性(以半數(shù)抑制率表達(dá)),發(fā)現(xiàn)耐藥株對(duì)柔紅霉素的敏感性明顯低于敏感株,而經(jīng)槲皮素預(yù)處理后耐藥株對(duì)柔紅霉素的半數(shù)抑制率明顯降低從而提高了對(duì)柔紅霉素敏感性;(二)用半定量RT-PCR法檢測(cè)各細(xì)胞株中MDR<,1>和MRP<,1>耐藥基因的表達(dá)情況,結(jié)果表明K562/ADM和HL-60/ADM細(xì)胞中分別

3、有MDR<,1>和MRP<,1>的過量表達(dá),槲皮素能夠下調(diào)這些基因的表達(dá);利用抗P-gp和MRP<,1>的單克隆抗體通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)P-gp和MRP<,1>耐藥蛋白的表達(dá)情況,也發(fā)現(xiàn)槲皮素也能夠劑量依賴性的抑制耐藥蛋白在細(xì)胞膜上的表達(dá);(三)利用柔紅霉素本身特有的熒光,通過激光共聚焦顯微鏡發(fā)現(xiàn)耐藥株中細(xì)胞內(nèi)熒光信號(hào)明顯減少,而經(jīng)槲皮素處理后逐漸恢復(fù)到接近敏感株細(xì)胞的水平,表明槲皮素能直接抑制P-gp和MRP<,1>的功能,恢復(fù)柔紅霉素