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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文芳樟醇通過激活GADD45α/JNK信號(hào)通路選擇性誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞凋亡的研究姓名:張婷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):血液內(nèi)科指導(dǎo)教師:徐榮臻20070501浙江大學(xué)碩上學(xué)位論文( 2 ) 正常人造血細(xì)胞培養(yǎng):正常人骨髓單個(gè)核細(xì)胞和外周血單個(gè)核細(xì)胞來自健康志愿者。2 。細(xì)胞增殖抑制試驗(yàn):采用M T T 法。3 .細(xì)胞周期分析:流式細(xì)胞術(shù)4 .細(xì)胞凋亡檢測與分析:流式細(xì)胞術(shù),P I /A n n e x i n —V 標(biāo)
2、記物檢測5 .腫瘤相關(guān)信號(hào)通路分析:采用G E A r r a yq 系列的H u m a nC a n c e r P a t h w a yF i n d e rI IG e n eA r r a y 分析白血病細(xì)胞經(jīng)芳樟醇藥物處理后基因表達(dá)譜的變化情況。6 .R T —P C R 分析:分析和檢測白血病細(xì)胞經(jīng)芳樟醇處理后r N A 表達(dá)的變化。7 .W e s t e r nb l o t 分析:分析和檢測白血病細(xì)胞經(jīng)芳樟醇處理后
3、蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果1 .芳樟醇能明顯抑制人T 細(xì)胞自血病細(xì)胞系M o l t 一4 、H 9 、J u r k a t 和B 細(xì)胞白血病細(xì)胞系R a j i 生長,其4 8 小時(shí)I 甌值分別為7 .0 9 1 - t M 、5 .7 9 1 l _ M 、1 1 .3 蛹和6 .4 6 t t M 。芳樟醇對(duì)人髓系白血病細(xì)胞系T H P I 、U 9 3 7 、和K G 一1 細(xì)胞生長儀有輕度或者沒有抑制作用,其4 8 小時(shí)I c 。
4、值分別為3 4 .8 9 f _ l M 、2 0 3 .9 9 P M 和3 7 1 .6 9 P M 。芳樟醇對(duì)人骨髓造血細(xì)胞和外周血細(xì)胞生長沒有明顯影響,當(dāng)藥物終濃度為l O O l J ~ l 時(shí),正常人骨髓造血細(xì)胞和外周血細(xì)胞牛長良好,未見有明顯生長增殖抑制。2 .芳樟醇能夠明顯誘導(dǎo)人T 細(xì)胞白血病細(xì)胞系M o l t 一4 凋亡,其凋亡細(xì)胞比例明顯上升。3 .芳樟醇處理M o l t - 4 細(xì)胞后,能使其G o /G ?s
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