超聲激活血卟啉對(duì)腹水型S180腫瘤細(xì)胞骨架影響的研究.pdf

1、癌癥研究已經(jīng)有幾百年的歷史了，但至今仍是威脅人類健康的主要惡性疾病之一。目前，治療癌癥的方法有很多種，傳統(tǒng)的治療方法包括手術(shù)療法、放療和化療等，但放療和化療對(duì)人體傷害很大，而手術(shù)治療往往又會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞隨血液循環(huán)發(fā)生轉(zhuǎn)移。1978年，美國(guó)學(xué)者Doughtery等首先提出光動(dòng)力學(xué)療法，并已經(jīng)應(yīng)用于臨床診斷治療腫瘤。但由于光的穿透能力差，該方法主要應(yīng)用于人體表面淺層腫瘤的治療，對(duì)深部和中晚期腫瘤的治療具有一定的困難。聲動(dòng)力學(xué)療法(Sonod

2、ynamic therapy,SDT)是 Umemura S等人于1989年在光動(dòng)力學(xué)療法(Phototdynamic Therapy,PDT)的基礎(chǔ)上提出的抗癌新思路和新方法，它是利用超聲激活富集且能長(zhǎng)時(shí)間潴留于腫瘤細(xì)胞內(nèi)的聲敏劑產(chǎn)生抗腫瘤因子從而殺傷腫瘤細(xì)胞。由于聲敏劑可以特異地聚集于腫瘤細(xì)胞，以及聚焦超聲照射對(duì)周圍健康組織基本沒有損傷，因此SDT療法具有良好的應(yīng)用前景，在腫瘤治療中受到了人們的廣泛重視。近年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者就SDT療法

3、進(jìn)行了廣泛而深入的研究，主要集中在其抗腫瘤機(jī)制的探討，并提出了空化效應(yīng)、單線態(tài)氧理論、羥自由基理論以及烷氧自由基理論等，但目前尚無定論。前期實(shí)驗(yàn)研究表明，聲動(dòng)力療法對(duì)腫瘤細(xì)胞具有殺傷和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡兩種模式，但對(duì)于SDT療法抑制腫瘤生長(zhǎng)和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的生物學(xué)途徑和機(jī)制方面研究較少。研究表明超聲激活血卟啉處理后，腫瘤細(xì)胞相關(guān)骨架蛋白表達(dá)受到抑制，并且可能在細(xì)胞凋亡或壞死中起重要作用。 本論文依托國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“超聲激活血卟

4、啉誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制的研究”的支持，采用頻率為1.34 MHz，3 W/cm<'2>的處理?xiàng)l件研究了超聲激活血卟啉對(duì)腹水型S180腫瘤細(xì)胞骨架蛋白的影響，所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1．超聲激活血卟啉對(duì)細(xì)胞質(zhì)骨架的影響：實(shí)驗(yàn)采用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)研究超聲激活血卟啉作用于S180腫瘤細(xì)胞后，不同時(shí)間段取材細(xì)胞質(zhì)骨架蛋白Actin、Tubulin、Vimentin(波形蛋白，中間纖維的一種)的動(dòng)態(tài)表達(dá)變化。研究結(jié)果表明：?jiǎn)为?dú)血卟啉對(duì)三

5、種細(xì)胞質(zhì)骨架蛋白的表達(dá)無明顯抑制作用；單獨(dú)超聲對(duì)三種細(xì)胞質(zhì)骨架蛋白表現(xiàn)出一定程度的抑制作用；而超聲結(jié)合血卟啉組聯(lián)合作用對(duì)Actin、Tubulin、Vimentin的抑制作用明顯高于單純超聲處理組，并且其抑制效應(yīng)呈時(shí)間依賴性變化，說明超聲激活血卟啉顯著增強(qiáng)了單純超聲的細(xì)胞毒作用，抑制細(xì)胞質(zhì)骨架蛋白的表達(dá)，影響細(xì)胞的分裂與增殖，降低細(xì)胞的生存能力，導(dǎo)致細(xì)胞壞死或凋亡。 2．超聲激活血卟啉對(duì)細(xì)胞核骨架的影響：聲動(dòng)力學(xué)處理后，采用免疫

6、細(xì)胞化學(xué)的方法檢測(cè)S180腫瘤細(xì)胞在不同時(shí)間取材LaminA和LaminB的表達(dá)變化情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：?jiǎn)为?dú)血卟啉組對(duì)LaminA和LaminB無明顯的表達(dá)抑制作用；單純超聲作用于S180腫瘤細(xì)胞后，LaminA、LaminB表達(dá)量減少，并隨取材時(shí)間的延長(zhǎng)，其蛋白表達(dá)量持續(xù)減少，超聲處理后3小時(shí)，腫瘤細(xì)胞內(nèi)LaminA和LaminB的表達(dá)量均急劇下降，并且通過比較發(fā)現(xiàn)，LaminA比LaminB對(duì)超聲的敏感性更強(qiáng)；而同等實(shí)驗(yàn)條件下，超聲