口服天然黃體酮給藥系統(tǒng)的設計.pdf

1、黃體酮屬天然孕激素類藥，口服后易在胃、腸、肝等多個組織代謝，首過效應強、口服生物利用度低且個體差異大，臨床常用注射給藥。但黃體酮大多需長期用藥，注射給藥給患者帶來了一定困難，脂質體由于磷脂雙分子層形成的囊泡結構，口服后可有效地保護藥物不被酶解，提高藥物體內外穩(wěn)定性，促進藥物吸收，提高藥物生物利用度。本文將孕激素類藥物天然黃體酮制成前體脂質體，期望利用脂質體的特點，促進黃體酮吸收，避免體內代謝，提高生物利用度，從而為黃體酮口服制劑的開發(fā)奠

2、定理論基礎。 本文利用新型前體脂質體制備方法制備了黃體酮前體脂質體，對黃體酮前體脂質體的處方設計、理化性質、胃腸液中的生物穩(wěn)定性、急性毒性、體外吸收、體內過程及首過效應進行了全面深入的研究，黃體酮前體脂質體的研究未見國內報道。 在黃體酮前體脂質體的處方優(yōu)選中，采用單因素考察和三元相圖優(yōu)選處方。在此基礎上對藥脂比進行優(yōu)選，最終確定前體脂質體處方。通過急性毒性試驗考察了黃體酮前體脂質體的急性毒性，結果黃體酮前體脂質體毒性較小

3、，半數(shù)致死量小于市售微粉化黃體酮膠丸。通過影響因素實驗和加速實驗，證明黃體酮前體脂質體對光及溫度均敏感，前體脂質體宜在陰涼干燥處保存。通過HPLC法測定黃體酮前體脂質體的含量。通過透射電鏡和掃描電鏡兩種方法觀察脂質體的形態(tài)，并對空白脂質體和含藥脂質體的形態(tài)進行比較，確定了脂質體為多層脂質體的形態(tài)。通過黃體酮脂質體粒徑、電位值測定，證實黃體酮脂質體粒徑為103.7nm、粒度分布較窄，脂質體荷負電，ζ電位為-88.9mv。通過葡聚糖凝膠柱層

4、析法測定脂質體的包封率，結果脂質體的包封率達54.95±9.98％。通過影響包封率的因素考察，表明藥脂比、稀釋倍數(shù)均影響脂質體的包封率。通過對前體脂質體在室溫及4℃的滲漏率進行考察，發(fā)現(xiàn)脂質體在4℃下較穩(wěn)定。通過對脂質體在人工胃液、人工腸液及大鼠胃內容物、不同腸段內容物中的穩(wěn)定性考察，結果證實脂質體在人工胃腸液及大鼠胃內容物中，保護作用不強，而在大鼠十二指腸、結腸內容物中保護作用較強，表明脂質體在體內能保護黃體酮避免被腸道降解。

5、 在此基礎上，建立了Caco-2細胞模型，從細胞水平初步研究了黃體酮及黃體酮脂質體的轉運及轉運機制，結果表明黃體酮屬生物藥劑學分類系統(tǒng)中的Ⅱ類藥物，黃體酮的吸收和分泌過程均受到某種載體蛋白的介導，為主動轉運方式，表觀滲透系數(shù)Papp(BL-AP)>Papp(AP-BL)，P-gp抑制劑的存在會增加吸收，提示P-糖蛋白存在。P-糖蛋白又稱“藥泵”，它可能量依賴性的將細胞內藥物泵出到細胞外，抑制P-糖蛋白的表達可能增加藥物吸收。而黃體酮脂質

6、體可通過改變黃體酮轉運機制，促進黃體酮跨膜轉運，打開細胞緊密連接、通過胞間轉運，從而有效提高黃體酮的吸收，MTT實驗結果表明黃體酮脂質體在1:250倍稀釋時對細胞毒性較小。大鼠灌胃黃體酮脂質體，研究了黃體酮脂質體的體內藥物動力學并與市售微粉化黃體酮膠丸作一對比，計算相對生物利用度。采用靈敏度高且臨床常用的放射免疫分析方法測定體內黃體酮含量，采用口服交叉給藥避免黃體酮口服的個體差異，采用摘除大鼠卵巢避免內源性黃體酮的干擾，采用頸靜脈插管術

7、進行血樣收集。結果黃體酮脂質體體內藥動學行為符合二室模型，與對照組相比，AUC值有顯著性差異，生物利用度明顯增加，相對生物利用度為289.19％。 采用三種不同給藥途徑給藥，測定黃體酮脂質體的首過效應，結果黃體酮脂質體在實驗條件下，約49.49％的黃體酮于首過肝臟時被代謝，約26.00％的黃體酮被胃腸道代謝；靜脈給藥后黃體酮脂質體較對照組有更大的生物利用度，體內清除率降低。因此認為黃體酮制成脂質體后能有效促進黃體酮吸收，延長黃體

8、酮在體內的駐留時間，提高黃體酮的生物利用度。 為了更有效地避免黃體酮在體內的代謝，進一步提高黃體酮的生物利用度。本文嘗試對黃體酮脂質體用殼聚糖進行表面修飾，并測定了修飾脂質體的理化性質。結果脂質體經修飾后，包封率有所降低，脂質體荷正電，修飾脂質體在大鼠胃液中穩(wěn)定性明顯提高，生物利用度明顯增加，初步證明本法形成的黃體酮脂質體表面修飾的可行性。 本文對黃體酮前體脂質體的體內外性質進行了一系列研究，對本法形成的脂質體的吸收機理