井岡霉素刺激褐飛虱生殖的蛋白質(zhì)組學(xué)分析及關(guān)鍵基因FAS的功能研究.pdf

1、褐飛虱（同翅目、飛虱科）是典型的農(nóng)藥誘導(dǎo)再猖獗型水稻害蟲。井岡霉素是防治水稻紋枯病的抗生素類殺菌劑，由于毒性低，殘留低，成本低等特點(diǎn)，很容易被濫用。目前已發(fā)現(xiàn)井岡霉素噴霧處理和點(diǎn)滴處理均能刺激褐飛虱生殖，且噴霧處理的刺激作用大于點(diǎn)滴處理，但其刺激褐飛虱生殖的分子機(jī)制仍不清楚。本試驗(yàn)通過井岡霉素不同處理間褐飛虱卵巢的蛋白質(zhì)組學(xué)分析，篩選出井岡霉素刺激褐飛虱生殖的關(guān)鍵蛋白，以闡明井岡霉素刺激褐飛虱生殖的分子機(jī)制，同時(shí)揭示噴霧處理刺激作用大于

2、點(diǎn)滴處理的原因。
　　1、井岡霉素不同處理間褐飛虱卵巢的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
　　利用同重同位素相對與絕對定量技術(shù)，對井岡霉素各處理間褐飛虱卵巢進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析。噴霧井岡霉素(JGM-S) vs噴霧對照(S-control)處理組共鑒定出284個(gè)差異蛋白（142個(gè)上調(diào)，142個(gè)下調(diào)），點(diǎn)滴井岡霉素(JGM-T) vs點(diǎn)滴對照(T-control)處理組共鑒定出267個(gè)差異蛋白（130個(gè)上調(diào)，137個(gè)下調(diào)），噴霧井岡霉素(JGM-

3、S) vs點(diǎn)滴井岡霉素(JGM-T)處理組共鑒定出114個(gè)差異蛋白（62個(gè)上調(diào)，52個(gè)下調(diào)）。通過pathway注釋與富集分析，篩選出噴霧井岡霉素(JGM-S) vs噴霧對照(S-control)處理組與噴霧井岡霉素(JGM-S)vs點(diǎn)滴井岡霉素(JGM-T)處理組中都顯著上調(diào)的脂肪酸合酶進(jìn)一步研究。
　　2、干擾脂肪酸合酶基因?qū)诛w虱生殖的影響
　　利用飼喂法對井岡霉素噴霧處理(JGM-S)的褐飛虱進(jìn)行RNA干擾，形成干擾

4、處理JGM-S+dsFAS（脂肪酸合酶基因表達(dá)量下降了58％）。產(chǎn)卵結(jié)果表明，干擾脂肪酸合酶基因后，褐飛虱產(chǎn)卵量下降46％，產(chǎn)卵歷期下降33％，雌蟲壽命下降24％。生理生化測定結(jié)果表明，dsFAS處理顯著降低了褐飛虱雌蟲體重和卵巢中粗脂肪含量。JGM-S+dsFAS處理組褐飛虱雌蟲卵巢中油酸、棕櫚酸、亞油酸、硬脂酸、肉豆蔻酸，脂肪體中油酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸含量與對照(JGM-S)相比均顯著下降。
　　3、褐飛虱吸食井岡霉素后生理生