N-乙酰-L-半胱氨酸對(duì)脂肪來(lái)源干細(xì)胞增殖與白介素-8分泌影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：脂肪來(lái)源干細(xì)胞(ADSCs)因能分泌多種生長(zhǎng)因子在燒傷創(chuàng)面的修復(fù)再生中有巨大應(yīng)用前景,但其產(chǎn)生的炎癥因子,如IL-8,可能造成創(chuàng)面的加深,抑制創(chuàng)面愈合。N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)作為化痰藥在呼吸道疾病中有廣泛用途,并可促進(jìn)多種細(xì)胞的增殖,抑制其凋亡,另外還被證實(shí)它可以調(diào)節(jié)多種炎癥因子如IL-8,TNF-α的表達(dá)。本文的研究目的是探索N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)是否會(huì)對(duì)ADSCs增殖、凋亡及分泌白介素-8(IL-8)的功能

2、產(chǎn)生影響。
　　方法：從人脂肪組織中分離、培養(yǎng)ADSCs,使用流式細(xì)胞術(shù)與免疫熒光技術(shù)鑒定細(xì)胞表型,確定其為脂肪來(lái)源干細(xì)胞。在含或不含NAC的培養(yǎng)環(huán)境下,使用CCK-8檢測(cè)ADSCs是增殖速度,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ADSCs死亡率,以rt-PCR和ELISA測(cè)定IL-8的mRNA及蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：ADSCs細(xì)胞呈成纖維細(xì)胞樣。流式細(xì)胞檢測(cè)提示CD90、CD44、CD13、CD105高表達(dá),CD14、CD71、CD34、C

3、D45低表達(dá)。免疫熒光結(jié)果顯示CD44、CD105高表達(dá),CD34、CD45低表達(dá),表明其為干細(xì)胞。40μg/mlNAC處理組第8天細(xì)胞光密度為1.217±0.165,對(duì)照組為0.794±0.031,處理組為對(duì)照組1.53倍(P<0.05)。NAC處理后ADSCs凋亡率與對(duì)照組相比降低了55.4％,從3.2%下降到1.65%(P<0.01);壞死率下降了48.8%,從7.65%下降到3.41%(P<0.01)。NAC處理組IL-8mRN

4、A表達(dá)水平下降到對(duì)照組的46.2±8.7%(P<0.01)。NAC處理組中IL-8水平為269.34±43.58pg/ml,對(duì)照組2690.26±371.09pg/ml,處理組為對(duì)照組9.98±0.57%(P<0.01)。
　　結(jié)論：從脂肪組織中可以成功分離、培養(yǎng)出ADSCs。NAC能促進(jìn)ADSCs增殖,抑制凋亡,并抑制IL-8表達(dá),在應(yīng)用ADSCs的燒傷創(chuàng)面的修復(fù)再生中,NAC可能有保持移植的ADSCs數(shù)量,減輕創(chuàng)面炎癥的作用。