熱性、寒性中藥對大鼠肝全基因表達譜影響的研究.pdf

1、目的:本研究旨在利用基因芯片技術探討熱性中藥附子、干姜,寒性中藥黃連、大黃對大鼠肝全基因表達譜的影響,以期從全基因組水平解析熱性及寒性中藥藥性作用機制,探討寒熱中藥屬性界定的可能依據(jù)和中藥藥性理論研究的思路與方法。
　　方法:SPF級Wistar雄性大鼠,50只,隨機分為附子組、干姜組、黃連組、大黃組和空白對照組,各中藥組分別灌胃附子水煎濃縮液1ml(含生藥0.675g)/100g,干姜水煎濃縮液1ml(含生藥0.405g)/10

2、0g,黃連水煎濃縮液1ml(含生藥0.225g)/100g,大黃水煎濃縮液1ml(含生藥1.35g)/100g,對照組予等容量生理鹽水。1次/日,連續(xù)給藥20天。給藥20天后,提取肝組織總RNA,應用Illumina公司RatRef-12基因芯片檢測各組大鼠肝臟基因表達,篩選差異表達基因,進行基因聚類分析和功能分類注釋。并選擇部分差異基因進行熒光實時定量PCR實驗驗證芯片結果的準確性。
　　結果:附子組與正常組比較有592條基因差

3、異表達,按照GeneOntology(GO)分類標準進行基因功能注釋,查詢到48項顯著性基因功能,主要涉及代謝過程、催化活性、免疫反應、磷酸鹽運輸?shù)?個GO功能亞類,代謝過程為最顯著性基因功能亞類。干姜組與正常組比較有1189條基因差異表達,查詢到98項顯著性基因功能,主要涉及代謝過程、免疫反應、催化活性、結合活性等8個GO功能亞類,代謝過程為最顯著性基因功能亞類。附子、干姜熱性中藥組與正常組比較篩選出337條共同差異基因,查詢到60項

4、顯著性基因功能,主要涉及代謝過程、免疫反應、催化活性、離子轉(zhuǎn)運等7個GO功能亞類,代謝過程為最顯著性基因功能亞類。黃連組與正常組比較有399條基因差異表達,查詢到44項顯著性基因功能,主要涉及防御反應、趨化、代謝過程、免疫反應等7個GO功能亞類,防御反應為最顯著性基因功能亞類。大黃組與正常組比較有398條基因差異表達,查詢到32項顯著性基因功能,主要涉及免疫系統(tǒng)過程、代謝過程、防御反應、催化活性等6個GO功能亞類,免疫過程、代謝過程為較

5、顯著性基因功能亞類。黃連、大黃寒性中藥組與正常組比較有141條共同差異表達基因,查詢到13項顯著性基因功能,主要涉及鐵離子結合、有機酸代謝和應答外部刺激3個GO功能亞類。
　　結論:熱性中藥可通過調(diào)控機體代謝及催化活性相關基因的表達,影響糖、脂類和氨基酸代謝過程,促進生物體內(nèi)能量的產(chǎn)生、貯存和利用;通過調(diào)控免疫相關基因的表達,發(fā)揮一定的免疫調(diào)節(jié)作用,這可能是溫熱性中藥“溫陽散寒”、臨床用于寒證治療的主要分子機制,可以作為熱性中藥藥